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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地深圳市
更新時(shí)間:2016-07-04 15:45:25瀏覽次數(shù):194次
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W-TMB顯色試劑 子科現(xiàn)貨供應(yīng)
英文名:W-TMB
相關(guān)類別:Western Blot
儲(chǔ)存:常溫下運(yùn)輸,收到后,將所有溶液2-8℃情況下保存,保質(zhì)期為一年
W-TMB顯色試劑 子科現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TMB的全稱為3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺,為無(wú)色物質(zhì),作為供氫體,在辣根過(guò)氧化物酶作用下,被氧化的情況下,產(chǎn)生有蘭色的產(chǎn)物,在特殊試劑的作用下沉淀在膜上,主要吸收峰在370 nm和652 nm,比色方便,是HRP結(jié)合物zui常用的底物,在免疫組織化學(xué)、原位雜交、Western blot、Southern blot等膜顯色中應(yīng)用比較廣泛,也可以用于原位檢測(cè)細(xì)胞或組織內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶。
操作步驟
1. 在免疫印跡實(shí)驗(yàn)中,先將相應(yīng)的HRP標(biāo)記的二抗覆蓋膜,37℃震蕩器上震蕩1-1.5 Hour,再用TBST或者PBST洗滌膜3~4次,zui后一次用TBS或PBS洗滌膜,將膜轉(zhuǎn)移到陰暗處。
2. 顯色前先將膜浸泡在10 mL的緩沖液C中10 min,再加入0.5 mL左右的底物溶液A和4μL底物溶液B,充分混勻。
3. 在陰暗處,在37℃的情況下,反應(yīng)5-30 min,這時(shí)蘭色的產(chǎn)物條帶出現(xiàn)。
4. 照像記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
注意事項(xiàng)
1. 緩沖液C在使用前充分震蕩混勻。
2. 請(qǐng)?jiān)谑褂们鞍凑丈鲜霰壤渲盟枞芤骸,F(xiàn)配現(xiàn)用,如果有多余,當(dāng)顏色變藍(lán)時(shí),應(yīng)該丟棄。
3. 請(qǐng)使用完后,將分析液A、分析液B和緩沖液C的蓋子旋緊,以防止溶液揮發(fā)和與空氣中的成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
4. 如果所使用的膜較大,請(qǐng)適當(dāng)增加所配試劑的量,以便*覆蓋膜。
5. 請(qǐng)正確配制western blot所需要的試劑,正確的膜轉(zhuǎn)移,抗體的稀釋和沖洗步驟,以保證能夠顯色和減少雜帶的產(chǎn)生。
6. 顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)10-30 min,再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,會(huì)使本底值增高,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。
7. 本試劑只能夠用于體外實(shí)驗(yàn),不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等目的,由此產(chǎn)生的后果概不承擔(dān)責(zé)任。
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