細菌活性化蛋白制備裂解液ZIKER
英文名：Bacterial Activity-Keeping Lysis Buffer
相關類別：蛋白裂解試劑與試劑盒    
儲存：常溫下運輸，收到后，將溶液A在4℃的冰箱冷藏室中保存；溶液B和固體C在-20℃環(huán)境中保存，保質期一年。

細菌活性化蛋白制備裂解液ZIKER產品簡介
一種比較溫和裂解細菌的方式，采用特殊的酶體系和溫和去污劑使樣品快速充分破裂，從而釋放蛋白質，內含作用強烈的蛋白酶抑制劑，從而保證了蛋白的完整和zui大限度保持細菌內蛋白的活性。合適用于細菌天然總蛋白，和重組的可溶解性蛋白質的提取，提取的可溶性蛋白與適量的結合液混合后，可以直接用GST標簽的重組蛋白質的提取。稀釋的本提取液也可以用于包含體的洗滌，提取的蛋白質可以用于SDS-PAGE、1D、2D電泳、Western Blot、免疫共沉淀和酶活性分析等后續(xù)研究。每次可以處理20mg濕重的菌體。

操作步驟
1. 將固體 C 全部溶解在溶液 A 中。
2. 將過夜培養(yǎng)的細菌培養(yǎng)物大約 1.5 mL 8000 rpm（5700 g）離心 1 min。
3. 按照每 20mg 濕重加混合后的溶液 A1 mL 和溶液 B 10 μL。
4. 在渦懸震蕩器上震蕩 1 min，讓菌體充分懸浮。.
5. 37℃溫育 1 hour，直到溶液變澄清為止。
6. 8000 rpm 離心 5 min，轉移上清到一個新的離心管中，作為可溶性蛋白質部分。
7. 沉淀加入 5 倍稀釋的混合后的溶液 A1 mL 和溶液 B 10 μL，在渦懸震蕩器上震蕩 1 min，靜置 30 min，中間偶爾顛倒混勻 2-3 次。再 8000 rpm 離心 5 min，去上清。
8. 重復7步驟1次。再用滅菌水洗滌包涵體沉淀，離心收集包涵體。
注意事項
1. 溶液A在4℃的冰箱冷藏室中保存，加入固體C后也應該在4℃的冰箱冷藏室中保存，盡量在一個月內使用完畢。
2. 充分裂解后溶液中溶液是很透明，而且沒有粘稠度。
3. 電泳和Western Blot 時有分子量為14400 Da（等電點9.38）和31000 Da兩個額外條帶，但是不影響使用。
4. 使用后，請旋緊瓶蓋，防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質發(fā)生化學反應。
5. 本試劑只能夠用于體外實驗，不能夠用于臨床、治療和動物體內實驗等，由此產生的后果概不承擔責任。

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