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山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒

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所  在  地深圳市

更新時間:2020-05-12 16:49:37瀏覽次數(shù):778次

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山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
英文名稱:Goat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA kit 
貨號:ZK-G6900
規(guī)格: 96T/48T
適用范圍:實驗結(jié)果僅供科研參考,不推薦用于臨床診斷結(jié)果。

用于標記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:
1、有高度的活性和敏感性;
2、在室溫下穩(wěn)定;
3、反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn);
4、能商品化生產(chǎn)。
當前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應(yīng)用zui廣。

山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析:
1、 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的LTB4標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

Folin-Phenol Reagent 福林酚蛋白濃度測定試劑        1000assays    子科ZIKER
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The kit contains reagents to prepare ten 1% denaturing RNA gels Features A Consistent & accurate results B All reagents are nucleases-free High binding capacity The kit contains 10 g agarose, 10XMOPs (2x500ml), 37% formaldehyde (200ml) 20xSSC (4 liters) n        1盒    子科ZIKER
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