Celltracker CM-DiI 新型細胞膜熒光探針 活細胞示蹤劑(橙紅色熒光探針),為DiI 的衍生物,在DiI 中加入了具有中度巰基反應(yīng)特性的氯甲基取代物,后者能與細胞內(nèi)含巰基的肽和蛋白結(jié)合,使得CM-DiI 能夠抵抗醛類的固定作用。CM-DiI 在細胞固定、破膜及石蠟包埋的整個過程中均能很好的保留在細胞內(nèi),因此,與傳統(tǒng)細胞膜探針DiI 相比較,更適于固定后標本的長期示蹤。
Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑(橙紅色熒光探針)
搜索關(guān)鍵詞:細胞膜熒光探針,紅色細胞膜探針DiI,綠色細胞膜探針DiO,DiD,DiR,DiA,CM-DiI,神經(jīng)示蹤,Life C7000,活細胞體內(nèi)外示蹤,CAS:180854-97-1
CM-DiI基本描述:
CM-DiI(活細胞的多代示蹤、固定細胞長期示蹤)
CellTracker CM-DiI為DiI的衍生物,在DiI中加入了具有中度巰基反應(yīng)特性的氯甲基取代物,后者能與細胞內(nèi)含巰基的肽和蛋白結(jié)合,使得CM-DiI能夠抵抗醛類的固定作用。CM-DiI在細胞固定、破膜及石蠟包埋的整個過程中均能很好的保留在細胞內(nèi),因此,與傳統(tǒng)細胞膜探針DiI相比較,更適于固定后標本的長期示蹤。其紅色/綠色的光譜特征,使其可與綠色探針或者綠色熒光蛋白如GFP一起用于雙標實驗。
CellTracker CM-DiI具以下特征:
a)使用方便,只需吸掉培養(yǎng)液,加入探針,30min孵育,顯微成像;
b)熒光信號至少可持續(xù)72h以上(一般3-6代),染料只傳到子代細胞,不會染上鄰近細胞。
c)毒性很低,不會影響細胞增殖和活力。
總而言之,CellTracker CM-DiI具有良好的示蹤特征,對細胞無毒,穩(wěn)定長效,染料很好保留在細胞內(nèi),生理pH熒光信號強。
研究證實,CM-DiI標記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定,陽性標記率達98%以上,標記細胞形態(tài)良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況;或?qū)擞浀募毎⑷塍w內(nèi),可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
CM-DiI(改良探針)與DiI(傳統(tǒng)探針)在透化和非透化處理樣本的效果比較:【來自文獻Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】
1、未透化組織DiI&CM-DiI標記完整性的比較
2、透化組織DiI&CM-DiI標記完整性的比較
結(jié)果顯示【見圖3&圖4】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標記組織封片后即刻檢測,不論是全細胞還是樹突段,結(jié)果都無明顯差異;兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標記組織封片2周后檢測,不論是全細胞還是樹突段,CM-DiI標記的穩(wěn)定性在熒光信號、光淬滅和zui終圖片質(zhì)量上都強于DiI。
不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果*。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對于DiI標記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。
溫馨提示:對于不經(jīng)透化處理的樣本,只需用傳統(tǒng)的細胞膜熒光探針如DiI染色即可。對于后續(xù)需透化處理的樣本,推薦用改良探針如CM-DiI(貨號:MX4007-50UG)進行染色。
CM-DiI基本特性:
1)CAS 80854-97-1
2)化學名:3H-Indolium, 5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1- octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride
3)分子式:C68H105Cl2N3O
4)分子量:1051.5g/mol
5) 純度:≥95%
6) 外觀:紅色固體
7) Ex/Em:553/570 nm(甲醇)
8) 推薦濾光器:Omega-XF32, Chroma-31002
9) 溶解性:溶于DMSO,乙醇,DMF
10)化學結(jié)構(gòu)圖:
細胞膜探針光譜和檢測濾片:
熒光探針 | zui大激發(fā)/zui大發(fā)射波長 (Ex/Em) | 濾光片編號 |
Omeaga公司 | Chroma公司 |
DiI | 549/565nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
CM-DiI | 553/570nm | XF32 | 31002 |
DiO | 484/501nm | XF100, XF2341001, 31001 | 41001, 31001 |
DiD | 644/665nm | XF110, XF47 | 41008, 31023 |
DiR | 750/780nm | XF112 | 41009 |
DiA | 456/590nm | XF21 | 31024 |
產(chǎn)品訂購信息:【現(xiàn)貨提供】
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | Ex/Em (nm) | 規(guī)格 | 價格(元) |
MX4007-50UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 1×50μg | 340.00 |
MX4007-250UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 5×50μg | 1360.00 |
MX4007-500UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 10×50μg | 2380.00 |
應(yīng)用文獻:
1. Hemmrich Ket al,Applicability of the dyes CFSE, CM-DiI and PKH26 for tracking of human preadipocytes to evaluate adipose tissue engineering.Cells Tissues Organs. 2006; 184(3-4):117-27.
2. Andrade W, et al, The use of the lipophilic fluorochrome CM-DiI for tracking the migration of lymphocytes.J Immunol Methods. 1996 Aug 14;194(2):181-9.
3. Schatteman GC, et al,Blood-derived angioblasts accelerate blood-flow restoration in diabetic mice.J Clin Invest. 2000 Aug; 106(4):571-8.
4. Foley-Comer AJ, et al, Evidence for incorporation of free-floating mesothelial cells as a mechanism of serosal healing.J Cell Sci. 2002 Apr 1;115(Pt 7):1383-9.
5. Djouad F, et al,Immunosuppressive effect of mesenchymal stem cells favors tumor growth in allogeneic animals.Blood. 2003 Nov 15;102(10):3837-44. Epub 2003 Jul 24.
6. Hosie KA, et al,Chronic excitotoxin-induced axon degeneration in a compartmented neuronal culture model.ASN Neuro. 2012 Feb 23;4(1). pii: e00076. doi: 10.1042/AN20110031.
— — Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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Celltracker CM-DiI 新型細胞膜熒光探針
Celltracker CM-DiI 新型細胞膜熒光探針