Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 鎂離子熒光探針

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

Mag-Fluo-4 AM；Mg²⁺ Indicator 鎂離子指示劑（熒光探針）；Fluo-4 AM；Low-affinity Ca²⁺ indicator 低親和鈣離子指示探針；Magnesium Green Indicator；

訂購(gòu)信息：

產(chǎn)品描述

具細(xì)胞膜滲透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM（貨號(hào)：MX4504-50UG）的一種結(jié)構(gòu)類似物，對(duì)鎂離子（Mg²⁺）和鈣離子（Ca²⁺）的Kd值分別是4.7mM和22µM，是一種非常有用的細(xì)胞內(nèi)鎂離子指示劑和低親和性鈣離子指示劑。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1）鎂離子指示探針

Mag-Fluo-4與Thermo（invitrogen）公司的Magnesium Green indicator相比，具更加靈敏的Mg2+熒光反應(yīng)。由于細(xì)胞內(nèi)Mg2+的生理波動(dòng)幅度通常很小，這一點(diǎn)點(diǎn)靈敏度的提高都是值得考慮的優(yōu)勢(shì)。與Fluo-4一樣，Mag-Fluo-4在不含二價(jià)陽(yáng)離子的情況下基本無(wú)熒光，一旦與Mg2+結(jié)合后，呈明顯的熒光加強(qiáng)，但無(wú)光譜遷移（見(jiàn)下圖）。

圖. Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液內(nèi)的熒光發(fā)射光譜

2）鈣離子指示探針

Mag-Fluo-4是Fluo-4的類似物，具有更低鈣離子結(jié)合親和性，特別適合用于檢測(cè)1 µM~1 mM范圍內(nèi)的胞內(nèi)鈣離子水平。

產(chǎn)品特性

1） 同義名：Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester, cell permeant

2） 分子式：C₃₇H₃₃F₂NO₁₈

3） 分子量：817.65 g/mol

4） 外觀：橙色固體

5） 純度：≥90%

6） Ex/Em：494/516 nm

7） 溶解性：溶于DMSO

8） 化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

注意事項(xiàng)

1） 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 儲(chǔ)存液制備

取一管低溫保存的Mag-Fluo-4 AM，置于室溫回溫至少20min。之后加入高質(zhì)量無(wú)水DMSO配制成1~5mM儲(chǔ)存液，比如50μg Mag-Fluo-4 AM（Mw：817.65 g/mol）溶于12μl DMSO，充分溶解后，即得到5mM儲(chǔ)存液。【注意】未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融，且要避光保存。盡快使用完。

2. 操作步驟

【注意】以下使用方法僅作參考，需根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求做出調(diào)整。

應(yīng)用示例（來(lái)自文獻(xiàn)，僅用作參考）

文獻(xiàn)一、Zheng JM et al. MagT1 regulated the odontogenic differentiation of BMMSCs induced byTGC-CM via ERK signaling pathway. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 31;10(1):48.

使用方法（細(xì)胞內(nèi)鎂離子水平的流式檢測(cè)）：1）用生理培養(yǎng)液（120 mM NaCl, 20 mM HEPES, 4.7 mM KCl, 1.2 mM KH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 1.25 mM CaCl2, and 10 mM glucose）于37℃預(yù)孵育BMMSCs細(xì)胞10min使其達(dá)到離子梯度的穩(wěn)定和平衡；2）用DMSO配制Mag-Fluo-4-AM儲(chǔ)存液1mM；3）取4ul Mag-Fluo-4-AM儲(chǔ)存液（1mM）和5ul 20% F-127，加入1ml培養(yǎng)基內(nèi)，充分混勻；4）取0.25ml 分散液加入0.75ml含細(xì)胞培養(yǎng)液，使得探針終濃度為1uM；繼續(xù)孵育30min，之后清洗細(xì)胞3次，之后再孵育30min保證細(xì)胞內(nèi)AM基團(tuán)的*去酯化；5）之后用流式細(xì)胞儀分析熒光強(qiáng)度（Ex/em:480/520nm）。

Fig 1. MagT1 knockdown reduced intracellular Mg2+ level in BMMSCs. Intracellular Mg2+ level was significantly reduced in MagT1 knockdown BMMSCs measured by indicator Mag-Fluo-4-AM using flow cytometry.

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——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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Mag-Fluo-4 AM, Cell 鎂離子熒光探針

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