小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒的樣本要求:
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒操作常見問(wèn)題:
1.邊緣效應(yīng)使用96孔板的ELISA測(cè)定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。
2.加樣,在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需注意的五個(gè)方面:
1.用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、*標(biāo)記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、*標(biāo)記抗體工作液、或辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒同類熱賣產(chǎn)品:
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 |
小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒 |
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 |
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 |
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 |
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 |
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 |
小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 |
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 |
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 |
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 |
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 |
小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 |