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當(dāng)前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>生物實(shí)驗(yàn)中抗血清制備及保存的注意事項(xiàng)
抗血清,是指機(jī)體經(jīng)抗原免疫后含特定抗體的血清。通過注射抗血清可以傳遞被動免疫(passive immunity)治療許多疾病。例如治療蛇毒。
生物實(shí)驗(yàn)中抗血清在制備及保存中的注意事項(xiàng)有以下幾點(diǎn):
1、動物的免疫反應(yīng)存在著個(gè)體差異,甚至有人報(bào)告不同品種動物一次免疫后產(chǎn)生的抗體的差別可高達(dá)500倍,所以制備抗血清時(shí)不能只免疫一只動物,一般免疫3~4只,因?yàn)橛械膭游锟赡墚a(chǎn)生抗體效價(jià)很低或不產(chǎn)生抗體,免疫反應(yīng)好的動物所能提供的抗體往往高于一般動物3~4倍。
2、為制備單價(jià)特異性高的抗血清,所用抗原純度越高越好,因此,在純化抗原過程中應(yīng)盡量除去可能存在的雜蛋白,這樣可以省去許多時(shí)間來吸收抗血清中的非特異性抗體。
3、要制備價(jià)的抗體,必須要加佐劑(一般采用*福氏佐劑),加佐劑后免疫動物,抗體效價(jià)至少可增加5倍。但也應(yīng)考慮到,如果抗原中有微量的雜蛋白存在,即使0.005mg,亦可因有佐劑而產(chǎn)生非特異性的抗體,所以要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和抗原的純度適當(dāng)?shù)厥褂米魟?/span>
4、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應(yīng)進(jìn)行檢查,否則會影響免疫效果,如不是油包水乳劑,應(yīng)重新制備。
5、當(dāng)抗原量過少不易提純時(shí),可采用抗原抗體在瓊脂擴(kuò)散中形成的沉淀線直接免疫動物制備抗體。
6、抗血清效價(jià)一般以抗血清稀釋倍數(shù)表示。血清效價(jià)的檢測方法很多,靈敏度各不同,因此在表示抗血清效價(jià)時(shí),應(yīng)標(biāo)明檢測方法。另外,在沉淀反應(yīng)中,出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原、抗體比例有一較大的范圍,如用不同濃度的抗原測定效價(jià)時(shí),結(jié)果會因此有別,所以在測定抗血清效價(jià)時(shí),需注意抗原的濃度。
7、分裝保存的抗血清應(yīng)注明抗血清的名稱,效價(jià),制備日期以及包裝量。
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