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　　人elisa試劑盒的制備要點：

　　1、隨著人們對病原體感染與機體免疫應(yīng)答的逐步認識，以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的，更為快速簡便的免疫檢驗方法就應(yīng)運而生了。

　　2、試驗中各個操作步驟常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助：這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測的病原體感染診斷治療的要求，迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑，直接的或是間接的。

　　人elisa試劑盒質(zhì)量保證是一個復(fù)雜的過程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量：

　　一、方法學(xué)的影響

　　ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法（HBeAb,HBcAb等采用）因受操作時差所引起的不*平競爭等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。

　　二、試劑因素

　　不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量**，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。

　　三、樣本因素

　　標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復(fù)凍融等。

　　四、操作因素對小鼠腫瘤標志物（CA724）ELISA試劑盒結(jié)果的影響：加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

　　五、灰區(qū)的設(shè)置

　　通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”（cut-off value，CO值），這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。

　　六、標本復(fù)查

　　ELISA手工檢測過程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準確性的可靠方法。

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