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微生物肽聚糖ELISA試劑盒的試劑準(zhǔn)備：

1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

500pg/ml	（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
250pg/ml	（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml	（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
62.5pg/ml	（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
31.2pg/ml	（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15.6pg/ml	（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）	100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0pg/ml	（空白對(duì)照）	原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

2.洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

微生物肽聚糖ELISA試劑盒的操作流程：

1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL，37℃孵育90分鐘；

2.加入100μL 生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘；

3.洗滌3次；

4.加入100μL酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘；

5.洗滌5次；

6.加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右；

7.加入50μL終止液，立即在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量OD值；

8.結(jié)果計(jì)算。

微生物肽聚糖ELISA試劑盒的結(jié)果判斷與分析：

1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的LAM標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LAM含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
3、檢測(cè)值范圍：0-480ng/ml
4、敏感度：0.1ng/ml