膠體金是一種常用的標記技術(shù),是以膠體金作為示蹤標志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術(shù),有其*的優(yōu)點。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能例用到。
膠體金 - 鑒定和保存
膠體金的制備并不難,但要制好高質(zhì)量的膠體金卻也并非易事。因此對每次制好的膠體金應(yīng)加以檢定,主要檢查指標有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。在日光下仔細觀察比較膠體金的顏色,可以粗略估計制得的金顆粒的大小。當然也可用分光光度計掃描λmax來估計金顆粒的粒徑。制備的膠體金作電鏡觀察,并選一些代表性的作顯微攝影,可以比較地測定膠體金的平均粒徑;良好的膠體金應(yīng)該是清亮透明的,若制備的膠體金混濁或液體表面有漂浮物,提示此次制備的膠體金有較多的凝集顆粒。
膠體金在潔凈的玻璃器皿中可較長時間保存,加入少許防腐劑(如0.02%NaN3)可有利于保存。保存不當時會有細菌生長或有凝集顆粒形成。少量凝集顆粒并不影響以后膠體金的標記,使用時為提高標記效率可先低速離心去除凝集顆粒。
膠體金 - 注意事項
1、氯金酸易潮解,應(yīng)干燥、避光保存。
2、氯金酸對金屬有強烈的腐蝕性,因此在配制氯金酸水溶液時,不應(yīng)使用金屬藥匙稱量氯金酸。
3、用于制備膠體金的蒸餾水應(yīng)是雙蒸餾水或三蒸餾水,或者是高質(zhì)量的去離子水。
4、是以制備膠體金的玻璃容器必須是清潔的,用前應(yīng)先經(jīng)酸洗并用蒸餾水沖凈。是經(jīng)硅化處理的,硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯坊溶液浸泡數(shù)分鐘,用蒸餾水沖凈后干燥備用。
5、膠體金的鑒定和保存:膠體金的制備并不難,但要制好高質(zhì)量的膠體金卻也并非易事。因此對每次制好的膠體金應(yīng)加以檢定,主要檢查指標有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。