当着夫的面被夫上司玩弄,最近免费中文字幕中文高清百度 ,超碰CAOPORON入口,精品国产日韩一区二区三区

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

上海仁捷生物科技有限公司


當前位置:上海仁捷生物科技有限公司>技術文章>老師們如何降低ELISA試劑盒實驗背景的方法
技術文章

老師們如何降低ELISA試劑盒實驗背景的方法

閱讀:348發(fā)布時間:2017-3-10

洗滌很重要
洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
封閉更關鍵
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。
如果您一直被背景問題所困擾,那么也許您該花些時間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時間,但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、ELISA試劑盒吸附的抗原、您的抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
ELISA實驗zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過程中的一些非特異結合上很有用。但它們只在存在時起作用,ELISA試劑盒因為很容易被洗掉。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會降低特異結合,產(chǎn)生假陰性。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協(xié)助洗滌過程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與開放位點結合并封閉,同時穩(wěn)定與微孔板結合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過,它的缺點在于能與ProteinA和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
抗體濃度須優(yōu)化
ELISA實驗我們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟,ELISA試劑盒但是如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
檢測試劑要適量
另一點也很顯而易見:切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應加入終止液。


環(huán)保在線 設計制作,未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.yixinui.com,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,環(huán)保在線對此不承擔任何保證責任。 溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質及產(chǎn)品質量。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
阆中市| 仁化县| 龙陵县| 东兰县| 泰和县| 新河县| 菏泽市| 大关县| 清苑县| 文成县| 华亭县| 阳高县| 上饶市| 丹寨县| 于田县| 乌兰察布市| 芒康县| 峨边| 临漳县| 科技| 萨嘎县| 三穗县| 赤水市| 梅州市| 南乐县| 梨树县| 定西市| 江永县| 高碑店市| 西昌市| 青州市| 石楼县| 德格县| 开鲁县| 成武县| 巍山| 逊克县| 龙里县| 巧家县| 吉木萨尔县| 宁都县|