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間接凝集實驗原理詳細說明
2017-3-9 閱讀(1124)
一、原理
可溶性抗原(或抗體)吸附于免疫學反應無關的顆粒(稱為載體)表面上,當這些致敏的顆粒與相應的抗體(或抗原)相遇時,就會產(chǎn)生特異性的結合,在電解質參與下,這些顆粒就會發(fā)生凝集現(xiàn)象。這種借助于載體的抗原抗體凝集現(xiàn)象就叫做間接凝集反應(Indirect agglutination reaction)。
載體的存在使反應的敏感性得以大大提高。間接凝集反應的優(yōu)點為:①敏感性強:間接凝集反應是zui敏感性的血清學反應方法之一,可以檢測到微量的抗體和抗原;②快速:一般1h~2h即可判定結果,若在玻板上進行,則只需幾分鐘;③特異性強;④使用方便、簡單。
二、載體
具有吸附抗原(或抗體)的載體很多,如聚苯乙烯乳膠、白陶土、活性炭、人和多種動物的紅血球、某些細菌等。
良好載體有如下幾點基本要求:
①在生理鹽水或緩沖液無自凝傾向;
②大小均勻;
③比重與介質相似,短時間內不能沉淀;
④無化學或血清學活性;
⑤吸附抗原(或抗體)后,不影響其活性。
目前應用zui廣的是人的O型紅血球和綿羊紅血球。而后者應用更廣,因為其來源方便。另外綿羊紅血球的表面有大量的(約1000個以上)糖蛋白受體,極易吸附某些抗原物質,吸附性能好,且大小均勻一致。
三、間接凝集的分類
1、根據(jù)載體的不同,可分為間接炭凝、間接乳膠凝集和間接血凝等。
2、根據(jù)吸附物不同可分為間接凝集反應(吸附抗原)和反向間接凝集反應(吸附抗體)。
3、根據(jù)反應目的不同,又可分為間接凝集抑制反應和反向間接凝集抑制反應。
4、根據(jù)用量和器材的不同又可分為試管法(全量法)、凹窩板法(半微量法)和反應板法(微量法)。
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