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江蘇菲亞生物科技有限公司
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WB實驗的錦囊妙計
2017-3-9 閱讀(1015)
Western Blot實驗它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。于此同時，我們好多客戶反映做該實驗檢測失敗，由此分析：WB實驗真的不好做，還是客戶沒有把握好WB實驗的注意事項或者小訣竅？現(xiàn)恒遠公司年終總結(jié)做WB實驗的錦囊妙計：
1.清洗好玻璃板，我公司技術(shù)強調(diào)這一步工作不能偷懶，很多時候跑完電泳撬膠時會因為玻璃板不干凈膠粘在板上把膠撬破。
2. 配膠時不要反復(fù)用槍混，稍微搖混就可以了，用槍混多次會導(dǎo)致膠凝不好影響電泳圖的分辨率。
3. AP 分裝成500 微升一管保存放20 度，避免 AP 用太久失效。
4. 倒膠時把玻璃板中的水用濾紙盡量吸干，因為微量的水存在會影響配的膠濃度。
5. 盡量不用過ye放室溫或者四度的膠，也回影響膠 的分離效果。
6. 電泳完撬膠時根本不需要用撬膠板，在一平皿里裝好水，把有膠一面的放在水中晃動幾
次膠很容易就脫落下來，一點沒有問題，方便的很。
7. 點樣時樣品別忘了離心這步，因為上樣含有固體沉淀會影響電泳圖分辨效果。
8.盡量在冰浴狀態(tài)下跑
