上海研盟生物科技有限公司Anti-Retinol binding protein抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取。客服
*結(jié)合蛋白抗體,Anti-Retinol binding protein抗體簡(jiǎn)單介紹:
中文名稱:*結(jié)合蛋白抗體
英文名稱:Anti-Retinol binding protein antibody
產(chǎn)品別名:Cellular retinoic acid binding protein 1; Cellular retinoic acid-binding protein 1; Cellular retinoic acid-binding protein I; CRABP 1; CRABP; CRABP I; CRABP-I; Crabp1; CRABPI; RABP1_HUMAN; RBP 5; RBP5; Retinoic acid binding protein I cellular.
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml、0.2ml、1ml
產(chǎn)品用途:科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品價(jià)格:請(qǐng)報(bào)價(jià)
說明書:請(qǐng)?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來源:該指標(biāo)有兩種產(chǎn)品,一種是兔來源抗體,一種是鼠來源抗體
克隆類型:兔來源為多克隆抗體,鼠來源單克隆抗體
交叉反應(yīng):請(qǐng)索取說明書查看
背景介紹:RBP2 is an abundant protein present in the smallintestinal epithelium. It is thought to participate in the uptakeand/or intracellular metabolism of vitamin A. Vitamin A is afat-soluble vitamin necessary for growth, reproduction,differentiation of epithelial tissues, and vision. RBP2 may alsomodulate the supply of retinoic acid to the nuclei of endometrialcells during the menstrual cycle.
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
*結(jié)合蛋白抗體保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
純化方法: affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
多抗親和層析純化
多抗的純化是一件比較簡(jiǎn)單的事情,因?yàn)槿斯じ深A(yù)比較大,所以對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作依賴性較強(qiáng)。很多新手覺得這是一件比較復(fù)雜困難的工作,但是如果理解了原理,就可以自行改進(jìn)實(shí)驗(yàn)了。多抗純化方法比較多,過去有用鹽析法純化的,有用辛酸-硫酸銨沉淀的方式純化的,也有用冷酒精沉淀的方式純化的,也有后來的離子交換層析和Protein A、G、A/G 純化的,但是在今天,市場(chǎng)上幾乎所有的抗體都是通過抗原親和純化得到的,與其它方法相比,抗原親和層析得到的抗體效率高、產(chǎn)量高、產(chǎn)品純、操作簡(jiǎn)單。鑒于很多網(wǎng)友問起這方面的問題,我就詳細(xì)地講一講親和純化原理和操作。
說到親和層析,還得從上個(gè)世紀(jì)60年代說起。當(dāng)年美國(guó)NIH(National Institutes of Health)
有個(gè)學(xué)生在研究一種酶和抑制劑之間的相互作用的時(shí)候,突發(fā)奇想:既然此酶可以和抑制劑結(jié)合,那如果把抑制劑固定起來,不就可以用來純化酶了嗎?試了一下覺得果然可行于是發(fā)了論文,從那之后,就出現(xiàn)了各種各樣的親和層析,親和配基與配體可以是酶與底物、酶與抑制劑、激素與受體、抗原和抗體、糖蛋白與凝集素、*與親和素、*與二價(jià)金屬離子、卟啉環(huán)與亞鐵離子等。親和層析精髓:將一種分子固定,用來吸附另一種特異性分子,zui后將其洗脫下來。
言規(guī)正傳,多抗的親和層析是基于抗原與抗體結(jié)合的一種層析方式。基本思路是將抗原固定在一種基質(zhì)(也就是柱的填料,大家都叫介質(zhì)或beads)上,然后與抗血清孵育以捕獲相應(yīng)的抗體,然后從基質(zhì)上洗掉非特異性結(jié)合的抗體,zui后再將抗體洗脫下來。
*結(jié)合蛋白抗體,Anti-Retinol binding protein抗體免疫組化問題解答:
1 染色過強(qiáng)
原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時(shí)間過長(zhǎng) 降低抗體滴度、抗體孵育時(shí)間:室溫1小時(shí)或4度過ye
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時(shí)間過長(zhǎng)或濃度過高 顯色時(shí)間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2 非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長(zhǎng)
c 組織中含內(nèi)原性* 正常非免疫動(dòng)物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長(zhǎng)血清蛋白封閉時(shí)間
3 染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時(shí)間過短 提高抗體濃度、孵育時(shí)間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時(shí)間 應(yīng)更換試劑
c 操作中添加試劑時(shí)緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 (應(yīng)防止切片干燥)
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
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