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人C肽(C-Peptide)ELISA實(shí)驗試劑盒檢測影響因素分析如下:
一、標(biāo)本的影響:溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,產(chǎn)生假陽性[2]。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。 標(biāo)本保存不當(dāng)。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。 塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空*;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。 標(biāo)本凝固不全。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
二、 試劑影響 ELISA試劑盒檢測試劑廠家較多;不同廠家出產(chǎn)的試劑
靈敏度與特異性存在一定的差別,使用質(zhì)劣的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性。因此,選擇高質(zhì)量的上海研盟生物科技有限公司的ELISA試劑盒是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵之一。
三、操作技術(shù)的影響:吸量不準(zhǔn)確,直接影響檢測結(jié)果。因此加樣器也要經(jīng)常清洗,定期校準(zhǔn)。
溫育影響:抗原抗體結(jié)合及酶促反應(yīng)對溫度有嚴(yán)格要求,酶標(biāo)板周圍與內(nèi)部孔升降溫速率不同,造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異;干浴與水浴存在明顯的差異,盡可能使用水浴,并要求固相板放入水中,減少受熱不均,貼密封膜,防止污物浸入。
加樣次序影響:有時我們在加樣過程中,常常會遇到個別標(biāo)本未離心等情況,為了節(jié)約時間,往往這時我們會先加酶結(jié)合物,然后等標(biāo)本分離好后再加標(biāo)本,這樣,竟常常會造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因為HBeAb和HBcAb都是競爭抑制法,先加入酶標(biāo)記的抗體,首先與固相載體上的抗原結(jié)合,待加入顯色劑后,因酶的存在而顯色,故呈陰性[3]。
綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,要從多方面進(jìn)行分析除試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并采取相應(yīng)措施排除干擾作用。
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人C肽(C-Peptide)ELISA實(shí)驗試劑盒介紹:
產(chǎn)品性狀:96T/Kit(8*12 strips)、48T/Kit(8*6 strips)
產(chǎn)地:德國、美國、中國
英文縮寫:Human C-Peptide ELISA Kit
產(chǎn)品性狀:盒裝液體。
產(chǎn)品特點(diǎn):靈敏性高,高效性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,人C-Peptide試劑盒是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產(chǎn)品。
使用范圍:此產(chǎn)品供科研實(shí)驗使用,不得用于臨床。
產(chǎn)品用途:人C肽試劑盒用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
檢測試劑盒說明書種屬:人
產(chǎn)品保存:2~8℃
有效期6個月。
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研盟生物產(chǎn)品優(yōu)勢
1.產(chǎn)品具有高效性、靈敏性、特異性等特點(diǎn)
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性,檢測種屬有人,動物,植物,金標(biāo)ELISA試劑盒等
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