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大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)：

1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4)使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7)底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

9)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

10)加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

11)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

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技術(shù)問(wèn)答：

問(wèn)：*可以用來(lái)直接稀釋血清嗎?

答：可以的，直接加40ul就可以了

問(wèn)：那我們算出來(lái)的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值?

答：說(shuō)明個(gè)別樣本的濃度很低，當(dāng)濃度接近第6個(gè)點(diǎn)的時(shí)候 直線方程就有可能計(jì)算出負(fù)值

問(wèn)：檢測(cè)的時(shí)候需要在操凈臺(tái)中操作嗎，還是在外面操作就可以了？

答：要求不是很嚴(yán)格，根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備而定，都可以。 

問(wèn)：我測(cè)植物水楊酸，標(biāo)本是煙草葉片怎么處理的？那上清液檢測(cè)SA時(shí)，還需要用甲醇抽提嗎？

答：稱取煙葉500mg，研磨成粉末狀，加入5ml濃度為0.01mol，PH值為7.4的PBS溶液，充分勻漿，離心取上清液3000-4000轉(zhuǎn)，15分鐘左右，分裝保存，一般需要*保存需放在-80度，或者液氮中，備用，不用加甲醇。