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大鼠趨化因子CC受體8(CCR8)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2019-02-14 15:36:39瀏覽次數(shù):228次

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“大鼠趨化因子CC受體8(CCR8)ELISA試劑盒"采用進(jìn)口ELISA抗體對(duì)組裝,標(biāo)曲可達(dá)到0.9989以上,具有高效、靈敏、特異、實(shí)驗(yàn)效果*的優(yōu)點(diǎn),我公司購買試劑盒可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),咨詢:

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英文名稱

Rat (CCR8) ELISA Kit

中文名稱

大鼠趨化因子CC受體8(CCR8)ELISA試劑盒

貨號(hào)

YMR30736

種屬

Rat/大鼠

規(guī)格

96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)

檢測(cè)方法

雙抗體夾心法以及雙抗體一步夾心法(來電索取說明,客戶自行選擇)

檢測(cè)范圍

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靈敏度

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大鼠趨化因子CC受體8(CCR8)ELISA試劑盒ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

方法一:用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜ye。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二:用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜ye。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗體)0.1ml,37℃孵育30~60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

 

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技術(shù)問答:

問:不同盒子里的孔下次能不能用?

答:一個(gè)盒子有96孔和48的 要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下,做點(diǎn)處理后在存放。

問:做出來的結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒有表達(dá),這是什么原因?

 答:樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測(cè)滴度。

問:收集血清的時(shí)候用什么管?

答:普通離心管即可。

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