背景介紹：Ubiquitination is an important mechanism through which three classes of enzymes act in concert to target short-lived or abnormal proteins for destruction. The three classes of enzymes involved in ubiquitination are the ubiquitin-activating enzymes (E1s), the ubiquitin-conjugating enzymes (E2s) and the ubiquitin-protein ligases (E3s). MARCH9 (membrane-associated ring finger (C3HC4) 9), also known as RNF179, is a 346 amino acid multi-pass membrane protein that localizes to the golgi apparatus and contains one RING-CH-type zinc finger. Expressed ubiquitously, MARCH9 exists as a homodimer and functions as an E3 ubiquitin-protein ligase that accepts a ubiquitin residue from an E2 ubiquitin-conjugating enzyme and is thought to promote the degradation of target proteins, such as CD4 and MHC-I. Multiple isoforms of MARCH9 exist due to alternative splicing events.

膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體,Anti-MARCH9抗體簡(jiǎn)單介紹：

別 名：E3 ubiquitin protein ligase MARCH9; MARCH IX; Membrane associated RING CH protein IX; membrane associated ring finger (C3HC4) 9; Membrane associated RING finger protein 9; RING finger protein 179; RNF179; MARH9_HUMAN.

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

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中文名稱：膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體

英文名稱：Anti-MARCH9 antibody

規(guī)格：0.1ml/0.2ml

濃度：1mg/1ml

抗體來(lái)源：本公司抗體有兔來(lái)源和鼠來(lái)源等

克隆類型：兔來(lái)源為多抗，鼠來(lái)源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

抗原修復(fù)（免疫組化石蠟切片）

用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片需要抗原修復(fù)。

福爾馬林固定的組織有可能破壞了原來(lái)組織的抗原結(jié)構(gòu)，蛋白多肽發(fā)生交聯(lián)，導(dǎo)致部分抗原表位封閉，結(jié)合位點(diǎn)減少，所以需要抗原修復(fù)，以暴露原來(lái)的抗原表位，達(dá)到充分顯露抗原，以不出現(xiàn)明顯脫片現(xiàn)象為佳。

抗原修復(fù)的幾種常用方法（供參考）

1、 微波爐加熱：

在微波爐里加熱0.01*緩沖液（pH6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5-10分鐘，反復(fù)1-2次。根據(jù)玻片情況可參考采用微波加熱“3-5-3法”3分鐘溫火沸騰后靜止5分鐘，再溫火沸騰3分鐘即可。

適用的抗原：來(lái)源于人、大鼠、小鼠的組織標(biāo)本；來(lái)源于其他動(dòng)物種屬的組織標(biāo)本。

2、 沸熱修復(fù)：

電爐或水浴鍋加熱0.01M*緩沖液（pH6.0）至95℃左右，放入組織芯片加熱10-15分鐘。

3、 高壓熱修復(fù)：

在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01m*緩沖溶液（pH6.0）.蓋上不銹鋼鍋蓋，但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢加壓，使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源，置入涼水中，當(dāng)小閥門沉下去后打開蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。（骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱修復(fù)） 。

4、 酶消化方法：

常用0.1%*和0.4%*液。*使用前預(yù)熱37℃，消化時(shí)間約為5-30分鐘。

適用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。

膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。

免疫組化問(wèn)題解答

1、染色過(guò)強(qiáng)？

原 因：抗體濃度過(guò)高或孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

解決方法：降低抗體滴度、抗體孵育時(shí)間：室溫1小時(shí)或4度過(guò)夜

原 因：孵育溫度過(guò)高超過(guò)37度

解決方法：一般在室溫20-28度

原 因：DAB顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高

解決方法：顯色時(shí)間不超過(guò)5-12分鐘，以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)

2、非特異性背景染色？

原 因：操作過(guò)程中沖洗不充分

解決方法：每步?jīng)_洗3次每次5分鐘

原 因：組織中含過(guò)氧化物酶未阻斷

解決方法：可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長(zhǎng)

原 因：組織中含內(nèi)原性*

解決方法：正常非免疫動(dòng)物血清再封閉

原 因：血清蛋白封閉不充分

解決方法：血清蛋白封閉不充分

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