背景介紹:The connexin family of proteins form hexameric complexes called connexons that facilitate movement of low molecular weight proteins between cells via gap junctions. Connexin proteins share a common topology of four transmembrane alpha-helical domains, two extracellular loops, a cytoplasmic loop and cytoplasmic N- and C-termini. Many of the key functional differences between connexins arise from specific amino-acid substitutions in the most highly conserved domains: the transmembrane and extracellular regions. Connexin 30, also known as GJB6 (Gap junction beta 6), ED2, EDH, HED or DFNA3, is a 261 amino acid multi-pass membrane protein that localizes to the cell junction and belongs to the connexin family. Functioning as a hexamer with other connexin proteins, connexin 30 facilitates the diffusion of low molecular weight materials from one cell to another. Defects in the gene encoding connexin 30 are the cause of ectodermal dysplasia type 2 (ED2) and non-syndromatic sensorineural deafness autosomal dominant type 3 (DFNA3), the former of which is characterized by abnormal development of ectodermal structures (such as skin and nails).
間隙連接蛋白30/GJB6抗體,Anti-connexin 30抗體簡單介紹:
別 名:Connexin 30; Connexin-30; Cx30; CXB6_HUMAN; DFNA3; ectodermal dysplasia 2, hidrotic (Clouston syndrome); ED2; EDH; Gap junction beta 6 protein; Gap junction beta-6 protein; gap junction protein, beta 6 (connexin 30); gap junction protein, beta 6; GJB6; HED; NSRD1.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
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中文名稱:間隙連接蛋白30/GJB6抗體
英文名稱:Anti-connexin 30 antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2ml
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
組織固定時間和所需的抗原熱修復(fù)的關(guān)系
大量的實(shí)驗(yàn)表明,固定時間越長的標(biāo)本,它所形成的橋連就越緊密,抗原就越難以被激活,所需要的修復(fù)強(qiáng)度也就越強(qiáng)。有意思的是隨著固定時間的延長,組織中蛋白對溫度的耐受也相應(yīng)增高,這可能就是我們對固定時間長的標(biāo)本加大修復(fù)強(qiáng)度的理論基礎(chǔ)。
這就提醒我們在做回顧性的研究時一定要注意所使用的修復(fù)條件,它與新鮮標(biāo)本的修復(fù)條件一定是有所區(qū)別的,同等條件下一定要加長修復(fù)的時間或提高修復(fù)所使用的溫度,才可能得到比較滿意的結(jié)果。
不同pH值抗原修復(fù)液對染色結(jié)果的影響
抗原熱修復(fù)中所使用的修復(fù)液pH值也會對染色結(jié)果產(chǎn)生相當(dāng)大的影響。
pH值對染色結(jié)果的影響大概可以分為以下四種情況:
A.穩(wěn)定型,pH值對染色結(jié)果影響不大,如PCNA、AE1、EMA、CD20等;
B.V型,高pH值和低pH值染色較好,而pH值4-5染色結(jié)果較差,如ER、Ki-67等;
C.上升型,隨著pH值的增加,染色結(jié)果逐漸增強(qiáng),如HMB45等;
D.下降型,隨著pH值的增加染色結(jié)果逐漸減弱,當(dāng)然這種類型的抗體只是個別的現(xiàn)象,如MOC31。
一個有趣的現(xiàn)象值得注意,即在高pH值都有較好的染色結(jié)果,所以目前比較推崇的抗原修復(fù)液為高pH值得修復(fù)液,如1mMEDTA, pH8.0或pH9.0等。但是由于傳統(tǒng)習(xí)慣,絕大多數(shù)醫(yī)院和實(shí)驗(yàn)室都在使用pH6.0的枸櫞酸緩沖液。綜合以上各種抗體的染色狀況,考慮到臨床工作的實(shí)際情況,許多國外免疫組化專家建議,在常規(guī)的免疫組化工作中,全部選用高pH值得修復(fù)液來代替目前廣為使用的pH6.0枸櫞酸緩沖液。為此,本公司已經(jīng)推出pH8.0和pH9.0的新型抗原修復(fù)液。經(jīng)驗(yàn)證,絕大多數(shù)的抗體使用pH9.0得修復(fù)液效果都要優(yōu)于pH6.0的枸櫞酸,尤其是核陽性的抗體。所以,在常規(guī)的免疫組化工作中,使用高pH值的抗原修復(fù)液是今后的必然趨勢。
間隙連接蛋白30/GJB6抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色過強(qiáng)?
原 因:抗體濃度過高或孵育時間過長
解決方法:降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過夜
原 因:孵育溫度過高超過37度
解決方法:一般在室溫20-28度
原 因:DAB顯色時間過長或濃度過高
解決方法:顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2、非特異性背景染色?
原 因:操作過程中沖洗不充分
解決方法:每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
原 因:組織中含過氧化物酶未阻斷
解決方法:可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
原 因:組織中含內(nèi)原性*
解決方法:正常非免疫動物血清再封閉
原 因:血清蛋白封閉不充分
解決方法:血清蛋白封閉不充分
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