背景介紹：This gene encodes a member of the Nedd4 family of HECT domain E3 ubiquitin ligases. HECT domain E3 ubiquitin ligases transfer ubiquitin from E2 ubiquitin-conjugating enzymes to protein substrates, thus targeting specific proteins for lysosomal degradation. The encoded protein mediates the ubiquitination of multiple target substrates and plays a critical role in epithelial sodium transport by regulating the cell surface expression of the epithelial sodium channel, ENaC. Single nucleotide polymorphisms in this gene may be associated with essential hypertension. Alternatively spliced transcript variants encoding multiple isoforms have been observed for this gene.

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泛素連接酶NEDD4-2抗體,Anti-NEDD4-2抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品，如生物試劑、生化試劑，一抗二抗，各種標(biāo)記抗體，Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒，放免試劑盒，培養(yǎng)基，各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品，歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。

中文名稱：泛素連接酶NEDD4-2抗體

英文名稱：Anti-NEDD4-2 antibody

規(guī)格：0.1ml/0.2m

濃度：1mg/1ml

抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等

克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

泛素連接酶NEDD4-2抗體,Anti-NEDD4-2抗體簡單介紹：

別 名：NEDD4L; E3 ubiquitin protein ligase NEDD4 like protein; E3 ubiquitin-protein ligase NEDD4-like; E3 ubiquitin-protein ligase NEDD4-like protein; KIAA0439; NED4L_HUMAN; NEDD4 2; NEDD4 2c; NEDD4-2; NEDD4-2a; NEDD4.2; NEDD4b; NEDD4L; NEDD4La; NEDD4Lb; NEDD4Lc; NEDD4Ld; NEDD4Le; NEDD4Lf; NEDD4Lg; NEDD4Lh; NEDL3; Neural precursor cell expressed developmentally down regulated 4 like E3 ubiquitin protein ligase; Neural precursor cell expressed, developmentally down regulated 4 like; RSP5; Ubiquitin protein ligase Rsp5.  

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價(jià)測定程序如下（如：羊抗鼠IgG-HRP的效價(jià)測定）：

1、抗原包板：15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔；

2、37°C包被60min或4°C過夜；

3、PBST洗板3次，5min/次；

4、加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔；

5、37°C 30min；

6、PBST洗板5min/次×3；

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min；

8、終止液：2N H2SO4 0.05ml/孔；

9、450nm 測定OD值；

陽性O(shè)D值比對照值大3倍，為判斷效價(jià)稀釋度。

免疫印跡法是一種通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)并通過電轉(zhuǎn)移把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到吸附膜上。一經(jīng)蛋白印跡后，即可通過特異性的標(biāo)記抗體檢測到相應(yīng)蛋白質(zhì)。

    十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）可用于檢測已被SDS化學(xué)變性的蛋白。然而，某些特定的抗體不會(huì)在一個(gè)變性的蛋白質(zhì)分子上識(shí)別其抗原表位，這時(shí)需要進(jìn)行不含SDS的聚丙烯酰胺凝膠電泳。

    蛋白印跡轉(zhuǎn)膜可以通過濕法或半干法進(jìn)行。在前者，凝膠夾在印跡膜和各種過濾裝置中間，然后把整個(gè)裝置埋進(jìn)一個(gè)裝滿Tris轉(zhuǎn)移緩沖的電極槽中。在后者，夾在中間的凝膠周圍只有少量的緩沖液，然后封閉在電極板之間。雖然半干法轉(zhuǎn)膜較快，但需要很好地?cái)M合各部分的夾層配件，而濕法轉(zhuǎn)膜很少會(huì)出現(xiàn)問題，可以盡量保持重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的*性。此外，如果半干法轉(zhuǎn)膜時(shí)間過長，較小分子量的蛋白質(zhì)可能會(huì)從膜上轉(zhuǎn)過。

    轉(zhuǎn)膜后，需對膜進(jìn)行封閉，以減少非特異性蛋白結(jié)合，然后進(jìn)行用一抗孵育膜，以研究感興趣的目標(biāo)蛋白。單克隆抗體通常具有更高的特異性；然而許多單克隆抗體產(chǎn)生于某個(gè)特定肽段而不是一個(gè)天然蛋白質(zhì)，因此可能無法檢測到PAGE所分離的天然蛋白。也可使用多克隆抗體，但易形成較高的背景值。因一抗通常無標(biāo)記，所以需要一個(gè)可以結(jié)合在一抗Fc段的標(biāo)記的二抗，以用于zui后的檢測。通常會(huì)用酶來標(biāo)記二抗。酶標(biāo)記后的印跡可通過化學(xué)發(fā)光酶底物及放射自顯影技術(shù)成像。被抗體檢測和標(biāo)記到的蛋白質(zhì)會(huì)出現(xiàn)在圖像的暗區(qū)。

斑點(diǎn)印跡法類似于免疫印跡法，在膜上檢測目標(biāo)蛋白；但是斑點(diǎn)印跡法中檢測的蛋白質(zhì)不用電泳進(jìn)行分離。取而代之的是，含有目標(biāo)蛋白的樣品被直接“點(diǎn)”到膜上，這不能做到定量檢測，但它可以直接檢測某種特定蛋白的有無。例如，斑點(diǎn)印跡法可用于檢測蔗糖梯度分離的細(xì)胞裂解產(chǎn)物中的某些蛋白質(zhì)定位。

泛素連接酶NEDD4-2抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。

免疫印跡試驗(yàn)常見的問題及原因

微弱的條帶（weak single）

可能存在的原因：蛋白與抗體結(jié)合率低  

解決方法:較少洗膜次數(shù)或者縮短洗膜時(shí)間；

降低洗膜液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）；

降低抗體稀釋液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）

可能存在的原因：抗體量不足 

解決方法:抗體和蛋白的結(jié)合較低，可將抗體濃度調(diào)整至初始濃度的2-4倍

可能存在的原因：蛋白量不足 

解決方法:增加蛋白上樣量

可能存在的原因：酶和底物時(shí)效   

解決方法:將酶和底物進(jìn)行反應(yīng)，觀察現(xiàn)象，出現(xiàn)異常，則需要重新標(biāo)記或者購買

可能存在的原因：過期或者陳舊的ECL發(fā)光液 

解決方法:更換的新的ECL發(fā)光液

可能存在的原因：脫脂奶粉可能會(huì)掩蓋一些抗原   

解決方法:降低牛奶的百分比或者用BSA代替

相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

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