背景介紹:The gene encoding MOBP a member of the central nervous system myelin-constituting proteins, maps to chromosome 3p22.2. MOBP has many splice variants that share a 68 amino acid N-terminal domain. MOBP-71, MOBP-81A, MOBP-99, and MOBP-169 are MOBP splice variants that contain exon 8b, which is similar to myelin basic protein (MBP) mRNA RTS, however MOBP-69, MOBP-81B, and MOBP-170 lack this exon. The splice variants that contain exon 8b are expressed in myelin, while those lacking exon 8b are retained in the oligodendrocyte soma. Exon 8b-containing variants are directed to sites of myelin sheath assembly by exon 8b, where they play a structural role in myelin formation. Splice variants lacking exon 8b likely play a cellular and/or regulatory role. MOBP is implicated in multiple sclerosis (MS), a human demyelinating disease, and in allergic encephalomyelitis in rodents.
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中文名稱:少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體
英文名稱:Anti-MOBP antibody
少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體,Anti-MOBP抗體-有關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)的重要問(wèn)題
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生理鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì),并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進(jìn)行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對(duì)于陳舊性標(biāo)本或固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的標(biāo)本,更應(yīng)注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強(qiáng)切片,但染色效果差,染色時(shí)也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個(gè)既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當(dāng)組織中全部被透明劑占有時(shí),光線可以透過(guò),組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進(jìn)行,但返工時(shí)往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時(shí)間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整,一般原則較小組織脫水時(shí)間和浸蠟時(shí)間較短;骨、肌肉等堅(jiān)硬組織脫水和浸蠟時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng);脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時(shí)間需增加
7.包埋包埋時(shí)應(yīng)注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑,或包埋時(shí)動(dòng)作太慢或石蠟?zāi)烫?,所以冷卻時(shí)水溫不能過(guò)高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來(lái)源:本公司抗體有兔來(lái)源和鼠來(lái)源等
克隆類型:兔來(lái)源為多抗,鼠來(lái)源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體,Anti-MOBP抗體簡(jiǎn)單介紹:
別 名:MGC87379; Myelin associated oligodendrocyte basic protein; MOBP_HUMAN.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
常用的抗原修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
方法3:高壓修復(fù),修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時(shí)開始計(jì)時(shí)修復(fù)2min,自然冷卻至室溫。
方法4:使用*修復(fù),將*修復(fù)液加入到組織上,37℃,消化30min
抗原修復(fù),必須注意以下問(wèn)題:
1、修復(fù)液的選擇。
0.01M枸櫞酸(pH6.0):應(yīng)用zui多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,用該液修復(fù)后的抗原表達(dá)增強(qiáng),抗原的定性和定位很理想,結(jié)果不錯(cuò);
0.05M EDTA(pH8.0):應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,修復(fù)能力較強(qiáng),對(duì)于保存時(shí)間較長(zhǎng)的切片或目的蛋白表達(dá)較弱的組織有很好的修復(fù)效果,需要控制好修復(fù)時(shí)間,否則容易出現(xiàn)較重的背景;
0.01M TBS(pH7.4):中性修復(fù)液,適用于大多數(shù)抗原,對(duì)于核定位蛋白有較好的修復(fù)效果;
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,使用溫度37℃,對(duì)于容易脫片的切片有很好的保護(hù)作用。
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原
2.抗原熱修復(fù)時(shí)應(yīng)選擇溫度。
據(jù)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為溫度在92℃-98℃是合適的,尤其在95℃為,這是因?yàn)椋海?)這種溫度未達(dá)沸騰,切片不容易脫離載玻片;(2)能夠解離和破壞與蛋白交聯(lián)的甲醛醛鍵等,處理時(shí)可以隨意選擇和確定抗原修復(fù)的作用時(shí)間。如果選擇高壓修復(fù),因?yàn)闇囟容^高,時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)
3.抗原修復(fù)時(shí)有效溫度所需持續(xù)時(shí)間根據(jù)各單位的設(shè)備條件以及使用的儀器不同,抗原修復(fù)時(shí)在有效的溫度范圍內(nèi)所持續(xù)的時(shí)間也不一樣。
4.抗原修復(fù)液必須遵循自然降溫規(guī)律,否則效果不好或達(dá)不到抗原修復(fù)的目的。
5.盡量使用足量的抗原修復(fù)液,防止切片干涸。
6.切片必須附貼牢固,否則發(fā)生掉片。
少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標(biāo)記的抗體孵育在同一張切片上,鏡下觀察時(shí)將不同的顏色組合在一起,將不同的抗原表達(dá)情況一起呈現(xiàn)出來(lái),這樣分析多個(gè)抗原的關(guān)聯(lián)性更客觀、更直接。
熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標(biāo)記的兩個(gè)抗體同時(shí)孵育后觀測(cè);間接法需要用到兩個(gè)不同種屬來(lái)源的一抗(例如一個(gè)鼠源抗體,一個(gè)兔源抗體),后面要選擇與一抗相對(duì)應(yīng)的二抗同時(shí)需要帶有不同的熒光素標(biāo)記(例如FITC標(biāo)記山羊抗小鼠和Cy3標(biāo)記山羊抗兔),間接法需要同時(shí)兼顧一抗和二抗的種屬關(guān)系,避免出現(xiàn)相互的交叉反應(yīng)。
相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
Anti-ARPC1A抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體
Anti-ARPC2抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2抗體
Anti-ARPC4抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體
Anti-ARPM1抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體
Anti-ARSI抗體,芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
Anti-ART1抗體,腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體
Anti-ARVCF抗體,精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體
Anti-ALDH1抗體,乙醛脫氫酶1型抗體
Anti-phospho-Ataxin 1(Ser775),磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
Anti-phospho-ATF1(Ser63),磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
Anti-phospho-ATF2(Ser480),磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
Anti-phospho-ATF2(Thr71),磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
Anti-ATF5抗體,活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體
Anti-ATF6 beta抗體,活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體
Anti-ATIC抗體,AICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體
Anti-phospho-ATM(Ser794),磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
Anti-ATP5E抗體,ATP5E蛋白抗體
Anti-ATP5G2抗體,ATP5G2蛋白抗體
Anti-ATP6V0D2抗體,ATP6V0D2蛋白抗體
Anti-ATP6V1B2抗體,ATP6V1B2蛋白抗體
Anti-ATPIF1抗體,ATPIF1蛋白抗體
Anti-Attractin抗體,Attractin蛋白抗體
Anti-Phospho-Aurora B(Tyr12),磷酸化有絲分裂激酶B抗體