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上海語純生物科技有限公司

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魚8-羥基*糖苷酶1(OGG1)elisa試劑盒

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)96T

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海

更新時(shí)間:2017-05-04 20:56:22瀏覽次數(shù):274次

聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線
魚8-羥基*糖苷酶1(OGG1)elisa試劑盒本產(chǎn)品質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,只需來樣即可為您免費(fèi)代測,歡迎訂購,該試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。酶聯(lián)免疫法試劑盒品牌多,價(jià)格好,歡迎選購!我司產(chǎn)品品質(zhì)*,價(jià)格從優(yōu)!專業(yè)的工作人員讓您,隨時(shí)隨地享受國外供應(yīng)商Z直接、Z周到、Z完善的售后

  產(chǎn)品名稱魚8-羥基*糖苷酶1(OGG1)elisa試劑盒

135 64515386    

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

檢測方法: ELISA酶聯(lián)免疫法

  書:隨貨發(fā)送,也可直接在線銷售索取

測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬

檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

試劑盒保存及有效期:2-8,避光保存:6個(gè)月。

產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國產(chǎn)

產(chǎn)品庫存:現(xiàn)貨

品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝

產(chǎn)品價(jià)格:*,洽談!

試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

產(chǎn)品價(jià)格:*,洽談!

試劑盒組成

 

          

96孔配置

12×8

48孔配置

12×4

  

 1

標(biāo)準(zhǔn)品(40ng/ml)

0.5ml

0.5ml

稀釋即用型

 2 

酶標(biāo)包被板

1

1

已包被即用型

 3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3ml

3ml

即用型

 4

鏈霉親和素-HRP

6ml

3ml

即用型

 5

30x倍濃縮洗滌液

20ml

20ml

蒸餾水稀釋

 6

*標(biāo)記的抗Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶12(Rock-1,2) 抗體

2ml

2ml

即用型

 7

顯色劑A

6ml

3ml

即用型

 8

顯色劑B

6ml

3ml

即用型

 9

終止液

6ml

3ml

即用型

10

說明書

1

1

即用型

11

封板膜

2

2

不可反復(fù)使用

12

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

即用型

需要而未提供的試劑和器材

1.    酶標(biāo)儀(450nm檢測波長濾光片,570nm630nm校正波長濾光片。

2.    洗板機(jī)(可調(diào)注液量,保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。

3.    超凈工作臺(tái),生物安全柜,通風(fēng)柜。

4.    高精度單道加液器(量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.    高精度多道加液器(8道或12道,量程為50-300μl).

6.    37恒溫箱。

7.    低溫離心機(jī)。

8.    電冰箱(4,-20,-86.

9.  漩渦混合儀,低頻振蕩器等

注意事項(xiàng)

1   2-8取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2   嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

3   為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

4   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

5   底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。

6.   所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸,使用時(shí)必須注意安全。

7.  各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校準(zhǔn)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

8.  每次試驗(yàn)測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔zui高濃度的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n)。

9.  配制試劑時(shí),要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑,充分混勻?qū)y試結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板1分鐘,例如做圓周動(dòng)作,使加入孔中的反應(yīng)液混勻。

10.  實(shí)驗(yàn)用酶標(biāo)儀應(yīng)嚴(yán)格按使用說明書規(guī)范操作,并在使用前充分預(yù)熱。

11.  手工洗板應(yīng)注意:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中

結(jié)果判斷

1.  每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值。(若不減零孔值,標(biāo)準(zhǔn)曲線的零孔應(yīng)相交于Y軸)

2. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應(yīng)用軟件來計(jì)算。

3.手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),OD值作縱坐標(biāo),以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。*使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析計(jì)算結(jié)果。

4.若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

 

操作總結(jié)

 

準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

 

加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,*標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑,37反應(yīng)60分鐘。

 
 

 

 洗板5次,加入顯色液A、B,37顯色10分鐘

 
 

  加入TMB終止液

 
 

 

10分鐘內(nèi)酶標(biāo)儀測OD

 
 

  計(jì)算待測樣本因子含量

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9200

2. 靈敏度:zui小可檢測濃度達(dá),0.078ng/ml。

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5 . 回收率:70-110%.

6. 貯藏:2-8,避光防潮保存。

7. 有效期:6個(gè)月

8. 檢測范圍:38ng/ml -0.312ng/ml

 

 

關(guān)于ELISA試劑盒

ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。

ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。

免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。

HBsAg試劑特點(diǎn)(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(PEIHBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml

ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。

LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。

特點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體;
  二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
  三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
  四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
  五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時(shí)忽略體積變化,如果測定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%

安全性

1 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。

2 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

4 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

5 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

6 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

7 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

8 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

9 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

10 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

11 加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

12 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

elisa試劑盒測試要求

做好對(duì)照

正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

實(shí)驗(yàn)條件的選擇

ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:

1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

2 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4 1824小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.010μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為110μg/ml。

3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取方陣法(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

檢測范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的*性不是很好。

試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線zui高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。

試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。

試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %

試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。

檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性

ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大。

 

 

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