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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)需要的試劑介紹及操作步驟
免疫組化檢測試劑盒中有三個必要的試劑:分別是免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等
完整的ELISA檢測試劑盒包含以下各組分:
1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
2.酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3.酶的底物;
4.陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
5.結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
6.洗滌液
7.酶反應(yīng)終止液。
常規(guī)ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)免疫組化檢測試劑盒在450nm波長處測定各孔的OD值。
* 進(jìn)口/國產(chǎn) 英文名稱 Artemether 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
姜黃素 進(jìn)口/國產(chǎn) 英文名稱 Curcumin 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
去甲氧基姜黃素 進(jìn)口/國產(chǎn) 英文名稱 Demethoxycurcumin 含量: HPLC≥96% 規(guī)格: 20mg/支
雙去氧基姜黃素 進(jìn)口/國產(chǎn) 英文名稱 Bisdemethoxycurcumin 含量: HPLC≥96% 規(guī)格: 20mg/支
莪術(shù)醇(姜黃醇) 進(jìn)口/國產(chǎn) 英文名稱 Curcumol 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
免疫組化檢測試劑盒
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