公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF說(shuō)明書的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱:人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF說(shuō)明書
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CDK4 Protein Human 重組人 CDK4 / CMM3 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CRABP2 Protein Human 重組人 CRABP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
UCHL3 Protein Human 重組人 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
UCHL1 Protein Human 重組人 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
COCH Protein Human 重組人 Cochlin / COCH 蛋白 (short isoform, His 標(biāo)簽)
COCH Protein Human 重組人 Cochlin / COCH 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SLAMF7 Protein Human 重組人 SLAMF7 / CRACC / CD319 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LTC4S Protein Human 重組人 LTC4S / LTC4 synthase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
HSP90AA1 Protein Human 重組人 HSP90AA1 / HSP90 蛋白
CDK1 Protein Human 重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
MMP2 Protein Human 重組人 MMP-2 / CLG4A 蛋白
S100A13 Protein Human 重組人 S100A13 蛋白
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SERPINE1 Protein Human 重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
S100A12 Protein Human 重組人 S100A12 / CAGC / Calgranulin-C 蛋白
USP7 Protein Human 重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
USP7 Protein Human 重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560)
USP7 Protein Human 重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560, His & GST 標(biāo)簽)
IL11RA Protein Human 重組人 IL11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RPS6KA6 Protein Human 重組人 RSK4 / RPS6KA6 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ABL1 Protein Human 重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
AKT1 Protein Human 重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFRSF1A Protein Human 重組人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GFRA3 Protein Human 重組人 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GLIPR1 Protein Human 重組人 GLIPR1 / RTVP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BAMBI Protein Human 重組人 BAMBI / NMA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SPINK4 Protein Human 重組人 SPINK4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MESDC2 Protein Human 重組人 MESDC2 / MESD 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DMBT1 Protein Human 重組人 DMBT1 / Muclin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FLRT3 Protein Human 重組人 FLRT3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標(biāo)簽)
L1CAM Protein Human 重組人 CD171 / N-CAML1 / L1CAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICAM3 Protein Human 重組人 CD50 / ICAM-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RELT Protein Human 重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標(biāo)簽)
AACS Protein Human 重組人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFRSF4 Protein Human 重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GFRA2 Protein Human 重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GFRA1 Protein Human 重組人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白 (His 標(biāo)簽)
KLK7 Protein Human 重組人 KLK7 / PRSS6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
OLFM4 Protein Human 重組人 OLFM4 / GW112 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GPC5 Protein Human 重組人 Glypican 5 / GPC5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LCK Protein Human 重組人 Lck Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL22RA2 Protein Human 重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)