公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*的報(bào)價(jià),咨詢(xún),稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng):人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。濾膜腸球菌瓊脂 用于腸球菌的濾膜法檢測(cè)(MERCK方法)
酵母粉瓊脂 用于水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
去氧膽酸鹽枸椽酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 用于致病性腸桿菌的分離培養(yǎng)
去氧膽酸鹽枸椽酸鹽瓊脂 用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)
胰胨大豆胨固綠瓊脂 用于濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)
LES Endo 瓊脂 用于濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Merck方法)
m-TGE 肉湯 用于奶制品中濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Acumedia方法)
m-TEC瓊脂 用于水中耐熱細(xì)菌濾膜計(jì)數(shù)(Acumedia方法)
現(xiàn)隱肉湯 用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)(US-EPA方法)
醋酸鹽瓊脂 用于細(xì)菌醋酸鹽試驗(yàn)
水平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 用于飼料中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定
R2A 瓊脂 用于飲用水中異生細(xì)菌分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
心浸液瓊脂 用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求高的微生物 (ACUMEDIA方法)
桔汁瓊脂 用于飲料中耐酸細(xì)菌的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
CATC瓊脂 用于食品和飲料腸球菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)
EEM培養(yǎng)基 用于致病性大腸桿菌的增菌培養(yǎng)和腸桿菌的增菌培養(yǎng)(Japan方法)
胰蛋白胨膽鹽瓊脂 用于大腸桿菌的膜過(guò)濾法選擇性培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
膽鹽七葉苷瓊脂 250 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
VRBG 瓊脂 250 用于奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)(FDA方法)
TSA 瓊脂 250 用于奶粉中坂崎桿菌的純化培養(yǎng)(FDA方法)
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]*胰蛋白胨大豆肉湯 250 用于*的MPN測(cè)定,增菌培養(yǎng),NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 250 用于*的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
亞碲酸鹽卵黃增菌液 5ml*10 加入Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中
兔血漿 0.5ml*20 用于*凝固酶試驗(yàn)
DNA酶瓊脂 100 用于核糖核酸酶檢測(cè)
7.5%氯化鈉肉湯 250 用于*的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基 250 用于*腸毒素產(chǎn)毒試驗(yàn)
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250 用于*的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
葡萄球菌增菌肉湯 250 用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性增菌
葡萄球菌選擇性瓊脂 250 用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
北沙參亞碲酸鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250 用于*的增菌培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉0.2ml
葡萄球菌選擇性瓊脂110(CHAPMAN 瓊脂) 250 用于*的分離培養(yǎng)
*卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250 用于*的分離培養(yǎng)(Japan方法)
V-J瓊脂 250 病源標(biāo)本和其它標(biāo)本中*陽(yáng)性*的選擇性分離(Merck方法)
改良Giolitti-Cantobi 肉湯 250 用于*的增菌培養(yǎng)
TMP瓊脂培養(yǎng)基 250 用于*的分離培養(yǎng)
緩沖蛋白胨水(BPW) 250 用于沙門(mén)氏菌前增菌培養(yǎng),亦可用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB) 250 用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng),需加入煌綠和碘液(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
膽硫乳瓊脂(DHL) 250 腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
三糖鐵瓊脂(TSI) 250 生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
SS 瓊脂 250 用于沙門(mén)氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
亞利桑那菌瓊脂(SA) 100 用于亞利桑那沙門(mén)氏菌的選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
氯化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Medium) 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
HE 瓊脂(HE) 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
賴(lài)氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 5 生化培養(yǎng)基,賴(lài)氨酸脫羧酶試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
尿素酶瓊脂基礎(chǔ) 250 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌脲酶檢測(cè)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
40%尿素水 5ml*10 加入尿素酶瓊脂基礎(chǔ)
V-P 半固體瓊脂 250 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌V-P試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
吲哚培養(yǎng)基 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn),亦稱(chēng)*肉湯(SN標(biāo)準(zhǔn))
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 10ml*1 吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn)配套試劑
丙二酸鈉培養(yǎng)基 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌丙二酸鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌衛(wèi)予醇發(fā)酵試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
GN 增菌液 250 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
XLD 培養(yǎng)基 250 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門(mén)氏菌(FDA標(biāo)準(zhǔn))
WS 瓊脂 250 用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離(GB標(biāo)準(zhǔn))