公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚肺二倍體細(xì)胞;HL*的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱:人胚肺二倍體細(xì)胞;HL*
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。11158營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于抗菌性能試驗(yàn),每升培養(yǎng)基中 添加 0.5g 吐溫-80
12151酵母碳源基礎(chǔ)(YCB)250g/瓶用于通過氮源的利用對酵母菌進(jìn) 行分類
12152酵母基礎(chǔ),無維生素250g/瓶用于通過維生素的利用對酵母菌 進(jìn)行分類
12153酵母菌形態(tài)瓊脂 250g/瓶用于酵母菌的形態(tài)學(xué)分類
12154酵母氮源基礎(chǔ)(YNB)250g/瓶用于通過碳源的利用對酵母菌進(jìn) 行分類
12155酵母氮源瓊脂250g/瓶用于通過碳源的利用對酵母菌進(jìn) 行分類
12156酵母氮源基礎(chǔ)、無氨基酸 250g/瓶用于通過碳源和氨基酸的利用對 酵母菌進(jìn)行分類
11159綜合馬鈴薯培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌培養(yǎng)
11162DG-18 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于霉菌酵母菌的計(jì)數(shù),每升培養(yǎng) 基中添加 220g 甘油
11163改良 DG-18 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于霉菌酵母菌的計(jì)數(shù),每升培養(yǎng) 基中添加 220g 甘油
11167葡萄糖蛋白胨肉湯250g/瓶用于霉菌、酵母菌檢測(日本藥典)
11168葡萄糖蛋白胨瓊脂250g/瓶用 于 真 菌 的 檢 測 ( 日 本 藥 典 ) 。每 200ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21116 制 成含抗生素的葡萄糖蛋白胨瓊脂
11170YM 肉湯250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的 培養(yǎng)
11171YM 瓊脂250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的 培養(yǎng)
11172馬鈴薯蔗糖瓊脂250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)
10106哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的檢驗(yàn),每 100ml 培養(yǎng) 基中添加 1 支 20102
11003卵黃瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng),每 100ml培養(yǎng)基中添加 2 支 21001
11006含鐵牛奶培養(yǎng)基250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌暴烈發(fā)酵試驗(yàn)
11008梭菌*250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)
11014產(chǎn)芽孢肉湯250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的芽孢試驗(yàn)
11015多價(jià)蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)
11017乳糖-明膠培養(yǎng)基250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的乳糖、明膠生 化試驗(yàn)
11020胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGYT 基礎(chǔ))250g/瓶用于肉毒梭菌增菌培養(yǎng),需添加1:250 * 51002
11021厭氧卵黃瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于肉毒梭菌增菌分離,每 100ml培養(yǎng)基中添加 3 支 21001
11022明膠磷酸鹽緩沖液250g/瓶用于肉毒梭菌和肉毒毒素檢樣的 制備
11023TSN 瓊脂250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的選擇性分離 和計(jì)數(shù)
11024TBB 培養(yǎng)基250g/瓶用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)
11027強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)250g/瓶用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì) 數(shù)和培養(yǎng)
11029強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的培養(yǎng)
11030強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)
11035SC 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(ISO),需添加 21009 及 21001
11001庖肉培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌或其它厭氧菌的培養(yǎng),需 添加適量 11002(GB、SN)
11055CW 瓊脂基礎(chǔ)(不含*)250g/瓶用于加熱材料魏氏梭菌的檢驗(yàn),需 添加卵黃鹽水懸液(21001)或脫 纖維血液(日本)
11056CW 瓊脂基礎(chǔ)(含*)250g/瓶用于加熱材料魏氏梭菌的檢驗(yàn),需 添加卵黃鹽水懸液(21001)或脫 纖維血液(日本)
10701Bolton 肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于彎曲菌選擇性增菌,每 100ml培養(yǎng)基中添加 1 支 20701
10702Skirrow 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每 100ml培養(yǎng)基中添加 20702、20703 各 1 支;若添加 1 支 20712 和 7%羊血 則組成改良 Skirrow 瓊脂
10703改良 CCD 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每 100ml培養(yǎng)基中添加 1 支 20702
10705布氏肉湯250g/瓶用于彎曲菌分離及動(dòng)力試驗(yàn)
10707布氏瓊脂250g/瓶用于彎曲菌、布魯氏菌屬分離
10709改良 CCDA 培養(yǎng)基250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每 100ml培養(yǎng)基中添加 1 支 20711
10708Bolton *250g/瓶用于彎曲菌選擇性增菌,每 100ml培養(yǎng)基中添加 1 支 20710
10712Campy-Cefex 瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶每 200ml 培養(yǎng)基中添加 10ml 馬血和 1 支 20716 ;若制備 改良 Campy-Cefex 瓊脂,每 200ml 培養(yǎng) 基中添加 10ml 馬血和 1 支 20718
10713改良 Camp-BAP 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用 于 彎 曲 桿 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 20719、20720各 1 支
20719改良 Camp-BAP 瓊脂基礎(chǔ)添加劑 11ml×10 支/盒
20720改良 Camp-BAP 瓊脂基礎(chǔ)添加劑 21ml×10 支/盒
11301BBL 瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)
11302PYG 液體培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌乙酸和乳酸代謝物測 定,每 100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支21301 和 1 支 21319
11303TPY 液體培養(yǎng)基250g/瓶雙歧桿菌 F6PPK 測定
11304MRS 培養(yǎng)基250g/瓶用于乳酸菌平板計(jì)數(shù),每 100ml 培 養(yǎng)基中添加 1 支 21302 制成改良 MRS 培養(yǎng)基