公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA說(shuō)明書(shū)的報(bào)價(jià),咨詢(xún),稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng):人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀(guān)察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀(guān)察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。10345DCLS 瓊脂250g/瓶用于沙門(mén)氏、志賀氏菌分離
10401GN 增菌液250g/瓶用于志賀氏菌增菌
10402SS 瓊脂250g/瓶用于腸道菌選擇性分離
10405葡萄糖銨瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于志賀氏菌生化試驗(yàn)
10407志賀氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用 于 志 賀 氏 菌 的 選 擇 性 增 菌(ISO),每 100ml 添加 0.05mg新生霉素
10357RV R10 肉湯250g/瓶用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)
10358Muller -Kauffmann 四硫磺酸鈉肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于沙門(mén)氏菌增菌,每 100ml 培 養(yǎng)基中添加 1 支 20315 和 1 支20316
11702金氏 B 培養(yǎng)基250g/瓶用 于 綠 膿 桿 菌 產(chǎn) 熒 光 鑒 定 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21702
11703乙酰胺肉湯250g/瓶用于銅綠假單胞菌產(chǎn)氨試驗(yàn)
11705十六烷基*基*培養(yǎng)基250g/瓶用于綠膿桿菌分離培養(yǎng)
11706乙酰胺培養(yǎng)基250g/瓶用于綠膿桿菌分離培養(yǎng)
11707綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基250g/瓶用于綠膿菌素測(cè)定,每 100ml 培養(yǎng) 基中添加 1 支 21702
11710溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于銅綠假單胞菌的選擇性分離
11713假單胞菌 CFC 選擇性培養(yǎng)基250g/瓶用 于 假 單 胞 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21702 和21704
11717假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于銅綠假單胞菌綠膿菌素測(cè)定, 每 100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21702
11726假單胞菌分離瓊脂250g/瓶用于假單胞菌的檢驗(yàn)
11728NAC 瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于銅綠假單胞菌的分離培養(yǎng)
11730洋蔥假單胞菌瓊脂基礎(chǔ)(PC)250g/瓶用于洋蔥假單胞菌的分離,每升培 養(yǎng)基中添加過(guò)濾除菌的 羥基噻吩 青霉溶液素(100mg)和多粘菌素 B 溶液(300,000units)
11401含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)250g/瓶用于李斯特氏菌的培養(yǎng)
11402含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)250g/瓶用于李斯特氏菌純化
11403李氏增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌增菌,每 225ml 培養(yǎng) 基中添加 1 支 21401 和 1 支 21402 組成 LB1,每 200ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21416 和 1 支 21417 組成 LB2
1404PALCAM 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用 于 李 斯 特 氏 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21403
11407Fraser 肉湯增菌液基礎(chǔ) 250g/瓶用于李斯特氏菌增菌,每 225ml 培養(yǎng)基中添加 21407、21408、21418 各 1 支組成 Half-Fraser,每 100ml 添加 1 套支 21419、21420 組成 Fraser
11408牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)250g/瓶用 于 李 斯 特 氏 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21409
11411EB 肉湯增菌液基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌,每225ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21410
11412改良 UVM 增菌液基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌,每225ml 培養(yǎng)基中添加 21422、21413各 1 支
11413LPM 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用 于 李 斯 特 氏 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21414
11414LPM 瓊脂基礎(chǔ)(含七葉苷與檸檬酸鐵銨)250g/瓶用 于 李 斯 特 氏 菌 選 擇 性 分 離 , 每100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21414
11415緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌,每225ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 21415
11416改良 McBride 瓊脂基礎(chǔ)(MMA)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性分離,每升 培養(yǎng)基中需添加 2.5g 苯乙醇及 200mg 環(huán)乙酰亞胺或 30mg *
21423改良牛津培養(yǎng)基10 支/盒每支用于 100ml11417 中
108017.5%氯化鈉肉湯250g/瓶用于*的均質(zhì)增菌
1080210%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯250g/瓶用 于 金 黃 色 葡 萄 球 菌 的 增 菌 和MPN 試驗(yàn)
10804Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于*的選擇性分 離與計(jì)數(shù),每 95ml 培養(yǎng)基中添加1 支 20801
10806腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基250g/瓶用于葡萄球菌產(chǎn)毒素檢驗(yàn)
10808卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于*選擇性分離, 每 65ml 培養(yǎng)基中添加 2 支 20804
10809*氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于*的選擇性分 離和培養(yǎng)
10811*卵黃培養(yǎng)基250g/瓶用于*計(jì)數(shù)(日本), 每 100ml 培養(yǎng)基中添加 2 支 21001
10815甲苯胺藍(lán)-DNA 瓊脂50g/瓶用于耐熱核酸酶試驗(yàn)
10816蛋白胨氯化鈉溶液250g/瓶用于葡萄球菌等微生物檢驗(yàn)中樣 品的制備
10817改良 GC 肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于葡萄球菌 MPN 計(jì)數(shù),每 9ml單料管中添加 0.1ml20805,每 10ml雙料管中添加 0.2ml20805
10820Vogel-Johnson 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于*選擇性分離, 每 100ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 20805
10821兔血漿纖維蛋白原(RPF)瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌檢測(cè),需添加 20805、20806、牛纖維蛋白 原、*抑制劑
10822哥倫比亞 CNA 瓊脂1000ml/瓶用于革蘭氏陽(yáng)性球菌的分離,也可 羊血制備哥倫比亞 CNA 血瓊脂
10823DNA 酶瓊脂100g/瓶用于核糖核酸酶檢測(cè)
10824葡萄球菌增菌肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌選擇性 增菌,每 100ml 中加入 1 支 20805
10825葡萄球菌培養(yǎng)基250g/瓶用于葡萄球菌的分離(明膠、甘露 醇發(fā)酵試驗(yàn))
1081410%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯250g/瓶用于*的增菌
10829Chapman 瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于*的分離培養(yǎng)
10830Chapman Stone 瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于*的分離培養(yǎng)
105013%氯化鈉堿性蛋白胨水250g/瓶用于副溶血性弧菌選擇性增菌