公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2保存的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱:人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2保存
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也
是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
碳瓊脂基礎(chǔ) (CM0119)Oxoid
胰蛋白胨葡萄糖提取物瓊脂 (CM0127)Oxoid
Tryptone Soya Broth(Soybean Casein Digest Medium USP)胰蛋白胨大豆肉湯Oxoid500G
Tryptone Soya Agar 胰蛋白胨大豆瓊脂現(xiàn)貨Oxoid500G
乳糖肉湯 (CM0137)Oxoid
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (CM0139)Oxoid
110號(hào)葡萄球菌培養(yǎng)基 (CM0145)Oxoid
沙保氏液體培養(yǎng)基 (CM0147)Oxoid
加強(qiáng)梭狀芽孢桿菌培養(yǎng)基 (RCM) (semi-solid) (CM0149)Oxoid
加強(qiáng)梭狀芽孢桿菌瓊脂 (CM0151)Oxoid
Simmons 檸檬酸鹽瓊脂 (CM0155)Oxoid
毛滴蟲(chóng)培養(yǎng)基基礎(chǔ) (CM0161)Oxoid
脫氧膽酸鹽瓊脂 (CM0163)Oxoid
布魯氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) (CM0169)Oxoid
液體巰基醋酸鹽培養(yǎng)基 (USP) (CM0173)Oxoid
Todd-Hewitt 肉湯 (CM0189)Oxoid
賴氨酸培養(yǎng)基 (CM0191)Oxoid
中國(guó)藍(lán)乳糖瓊脂 (CM0209)Oxoid
Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培養(yǎng)基Oxoid500G
腦心浸出液肉湯 (CM0225)Oxoid
脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (Hynes) (CM0227)Oxoid
胰蛋白示瓊脂基礎(chǔ) (CM0233)Oxoid
麥芽汁瓊脂 (CM0247)Oxoid
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ) (CM0259)Oxoid
過(guò)敏測(cè)試診斷瓊脂 (D.S.T.A.) (CM0261)Oxoid
亮綠瓊脂 (Kauffmann 培養(yǎng)基) (CM0263)Oxoid
血瓊脂基礎(chǔ) No. 2 (CM0271)Oxoid
Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ) (CM0275)Oxoid
三糖鐵瓊脂 (CM0277)Oxoid
胰蛋白示磷酸鹽肉湯 (CM0283)Oxoid
3號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287)Oxoid
C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (CM0301)Oxoid
賴氨酸脫羧酶肉湯片劑 (CM0308)Oxoid
W.L.營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基 (CM0309)Oxoid
E.E. 肉湯 (緩沖葡萄糖亮綠膽汁肉湯) (CM0317)Oxoid
DNase 瓊脂 (CM0321)Oxoid
平板計(jì)數(shù)瓊脂 (CM0325)Oxoid
1號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Seed 瓊脂) (CM0327)Oxoid
霍亂菌培養(yǎng)基TCBS (CM0333)Oxoid
Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337)Oxoid
MRS 肉湯 (CM0359)Oxoid
MRS 瓊脂 (CM0361)Oxoid
GC 瓊脂基礎(chǔ) (CM0367)Oxoid
腦心浸出液瓊脂 (CM0375)Oxoid
Slanetz and Bartley 培養(yǎng)基 (腸球菌瓊脂) (CM0377)Oxoid
賴氨酸鐵瓊脂 (CM0381)Oxoid
巰基醋酸鹽肉湯 (另一USP配方) (CM0391)Oxoid
D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393)Oxoid
支原體瓊脂基礎(chǔ) (CM0401)Oxoid
支原體肉湯基礎(chǔ) (CM0403)Oxoid
Sensitest 瓊脂 (CM0409)Oxoid
Hektoen 腸瓊脂 (CM0419)Oxoid
C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (帶Andrades 指示劑) (CM0423)Oxoid
Amies 轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基 (CM0425)Oxoid
S.I.M. 培養(yǎng)基 (CM0435)Oxoid
Schaedler Anaerobic Agar Schaedler 厭氧瓊脂Oxoid500G
標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂 APHA (CM0463)Oxoid
XLD 培養(yǎng)基 (CM0469)Oxoid
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