公司是*的ATCC細胞供應商,提供表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB培養(yǎng)
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細胞名稱:表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB培養(yǎng)
細胞形態(tài): 細胞株
生長特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲存:液氮
保存與運輸: 干冰常溫運輸
細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時
也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務于臨床實踐
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
D/E中和瓊脂250(g)
D/E中和肉湯250(g)
AC肉湯250(g)
標準2號營養(yǎng)瓊脂250(g)
m-TGE肉湯250(g)
m-TEC瓊脂250(g)
酵母粉瓊脂250(g)
液體沙氏培養(yǎng)基250(g)
A1培養(yǎng)基250(g)
LES Endo瓊脂250(g)
強化梭菌培養(yǎng)基250(g)
強化梭菌鑒別培養(yǎng)基250(g)
Wilkns-Chalgren瓊脂250(g)
TPGYT培養(yǎng)基基礎250(g)
SC瓊脂基礎250(g)
Schaedler瓊脂250(g)
M17肉湯100(g)
M17瓊脂100(g)
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎250(g)
改良麥康凱肉湯基礎(CT-MAC)250(g)
改良MC培養(yǎng)基250(g)
TTC營養(yǎng)瓊脂250(g)
LB肉湯250(g)
LB瓊脂250(g)
玉米粉瓊脂培養(yǎng)基250(g)
高氏一號合成培養(yǎng)基250(g)
L型細菌高滲糖*250(g)
L型細菌高滲鹽*250(g)
疊氮鈉葡萄糖肉湯250(g)
乙基紫疊氮鈉肉湯250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基1000(g)
KF鏈球菌瓊脂100(g)
KF鏈球菌瓊脂100(g)
BCYE瓊脂基礎100(g)
GVPC瓊脂基礎100(g)
GVPC添加物5支/盒
胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)250(g)
改良平板計數(shù)瓊脂(MPCA)250(g)
Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎250(g)
Elek氏培養(yǎng)基250(g)
麥芽浸粉瓊脂(MEA)250(g)
結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂(VRBA-MUG)100(g)
MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳糖苷)肉湯基礎100(g)
麥芽浸粉肉湯(MEB)250(g)
緩沖MUG瓊脂 (BMA)100(g)
胰化大豆-堅牢綠瓊脂(TSFA)250(g)
Columbia-MUG瓊脂培養(yǎng)基100(g)
Preston肉湯基礎250(g)
Preston 選擇性添加物4支/盒
CCDA基礎250(g)
彎曲菌血瓊脂基礎250(g)
Campy-Cefex瓊脂基礎100(g)
Campy-Cefex瓊脂基礎100(g)
MRS 肉湯(MRS)250(g)
MRS 瓊脂(MRSA)250(g)
改良克氏雙糖鐵瓊脂250(g)
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