公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書(shū)的報(bào)價(jià),咨詢(xún),稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng):牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞株
生長(zhǎng)特性:貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
儲(chǔ)存:液氮
保存與運(yùn)輸: 干冰常溫運(yùn)輸
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書(shū)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)
也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書(shū)冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉*,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 96T
PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體 96T
PDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3 96T
SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人*脫氫酶 96T
PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶 96T
OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit 人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶 96T
vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 96T
PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋白磷酸酶 96T
TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶 96T
HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit 人白細(xì)胞彈性蛋白酶 96T
Human Elastase ELISA Kit 人彈性蛋白酶 96T
AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α* 96T
ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性磷酸酶 96T
AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺素 96T
ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A 96T
PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰* 96T
AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶 96T
Human Collagenase Type II ELISA Kit 人膠原酶II 96T
Human Collagenase I ELISA Kit 人膠原酶I 96T
P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶C 96T
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)說(shuō)明書(shū)pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 96T
AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰*酯酶 96T
GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶 96T
TH(Human tyrosine hydroxylase) ELISA Kit 人*羥化酶
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