上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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- 型號(hào) T25
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更新時(shí)間:2021-08-23 17:01:53瀏覽次數(shù):245
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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細(xì)胞的訂購信息:
英文簡稱:KOSCS-2 clCQ-43細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:口腔鱗狀癌
規(guī)格:T25
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:2.2 x 10^4 CA-lls/ml
貨號(hào):CS-X64064
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞在對(duì)數(shù)生,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌消化過度,吹打不可太用力,不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測試劑盒英文名稱:IL1RAP ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框54抗體包裝5g
白介素1受體Ⅱ(IL1R2)檢測試劑盒英文名稱:IL1R2 ELISA Kit磷酸化鈣調(diào)節(jié)素抗體包裝1g
白介素1受體Ⅰ(IL1R1)檢測試劑盒英文名稱:IL1R1 ELISA Kit分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體包裝250mg
白介素1家族成員9(IL1F9)檢測試劑盒英文名稱:IL1F9 ELISA Kit磷酸化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體包裝250mg
白介素1δ(FIL1δ)檢測試劑盒英文名稱:FIL1δ ELISA Kit磷酸化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體包裝50mg
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒英文名稱:IL1β ELISA KitCD3抗體包裝5MG
白介素1α(IL1α)檢測試劑盒英文名稱:IL1α ELISA KitCD4抗體包裝1g
白介素19(IL19)檢測試劑盒英文名稱:IL19 ELISA Kit白共同抗原抗體包裝25g
白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)檢測試劑盒英文名稱:IL18BP ELISA Kit白共同抗原抗體包裝5g
白介素18(IL18)檢測試劑盒英文名稱:IL18 ELISA Kit白共同抗原抗體包裝100mg
白介素17F(IL17F)檢測試劑盒英文名稱:IL17F ELISA Kit間隙連接蛋白36抗體包裝500mg
白介素17C(IL17C)檢測試劑盒英文名稱:IL17C ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框61抗體包裝1g
白介素17B(IL17B)檢測試劑盒英文名稱:IL17B ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框63抗體包裝250mg
白介素17(IL17)檢測試劑盒英文名稱:IL17 ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框68抗體包裝100mg
白介素16(IL16)檢測試劑盒英文名稱:IL16 ELISA Kit角蛋白15抗體包裝500mg
KOSCS-2 clCQ-43細(xì)胞Drospirenone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tigecycline整合素αM/巨噬表面分子抗體包裝10g
Dutasteride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tigecycline血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體包裝50g
Epinephrine hydrochloride(標(biāo)...英文名稱: Tilmicosin血小板內(nèi)皮黏附分子1抗體包裝1g
Estradiol Benzoate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TilmicosinCD34抗體包裝25MG
Estradiol Cypionate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timolol MaleateCD36抗體包裝100ml
Estradiol Enanthate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timolol Maleate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝25ml
Estradiol Valeate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝5g
Estriol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝25g
Estrone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Base4號(hào)染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
Ethiny Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Base酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗體包裝25g
Ethisterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Sulfate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝5g
Etoposide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Sulfate膽固氧化酶抗體包裝250mg
Fasudil hydrochloride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tolnaftate半胱酸蛋白酶蛋白14抗體包裝1g
Fenofibrate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Topotecan HCl半胱酸蛋白酶蛋白5抗體包裝5g
Fenofibric acid(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Topotecan HCl豬瘟病抗體包裝1g