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公司產品僅用于科研以下是細胞的訂購信息：

英文簡稱：KARPAS-422細胞    

產品名稱：類B細胞淋巴瘤細胞

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：

生長特性：

特征特性：

培養(yǎng)條件：

傳代方法：

貨號：CS-X64061
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞在對數生，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關于“慢凍"，傳統的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
磺基轉移酶(PST)檢測試劑盒英文名稱：PST ELISA Kit22號染色體開放閱讀框9抗體包裝1g

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)檢測試劑盒英文名稱：SOD3 ELISA Kit腫瘤高表達周期相關蛋白抗體包裝25g

半乳糖凝集素9(GAL9)檢測試劑盒英文名稱：GAL9 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框117抗體包裝5g

半乳糖凝集素7(GAL7)檢測試劑盒英文名稱：GAL7 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框120抗體包裝1g

半乳糖苷酶β(GLβ)檢測試劑盒英文名稱：GLβ ELISA Kit補體C1qα鏈多肽抗體包裝25g

半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒英文名稱：GLα ELISA Kit補體C1qγ鏈多肽抗體包裝5g

半乳凝素8(GAL8)檢測試劑盒英文名稱：GAL8 ELISA Kit鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶抗體包裝1g

半乳凝素6(GAL6)檢測試劑盒英文名稱：GAL6 ELISA Kit老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體包裝5g

半乳凝素4(GAL4)檢測試劑盒英文名稱：GAL4 ELISA Kit質多聚腺苷酸結合蛋白3抗體包裝1g

半乳凝素2(GAL2)檢測試劑盒英文名稱：GAL2 ELISA KitComplexin I/復合素1抗體包裝5g

半乳凝素12(GAL12)檢測試劑盒英文名稱：GAL12 ELISA KitComplexin II/復合素2抗體包裝1g

半豐富血管生成誘導因子61(CYR61)檢測試劑盒英文名稱：CYR61 ELISA Kit轉錄調節(jié)因子C/EBPγ抗體包裝25g

半蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測試劑盒英文名稱：CST3 ELISA Kit質連接蛋白2抗體包裝5g

白細胞衍生趨化因子2(LECT2)檢測試劑盒英文名稱：LECT2 ELISA KitCD20抗體包裝100g

白細胞衍生趨化因子1(LECT1)檢測試劑盒英文名稱：LECT1 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框40抗體包裝500g
KARPAS-422細胞Androstenedione（標準品）英文名稱： Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)1號染色體開放閱讀框41抗體包裝100ml

Argatroban（標準品）英文名稱： Saracatinib(AZD0530)1號染色體開放閱讀框144抗體包裝500ml

Atipamezole HCl(標準品)英文名稱： Secnidazole4號染色體開放閱讀框3抗體包裝1g

Atomoxetine HCl(標準品)英文名稱： Secnidazole組織蛋白酶S抗體包裝1g

Atorvastatin calcium(標準品)英文名稱： Sequoyitol死亡誘導蛋白抗體包裝5g

Bambuterol HCl(標準品)英文名稱： Sermorelin Acetate前列腺雄抑制信號蛋白1抗體包裝1g

Beclomethasone Dipropionate...英文名稱： Silver Sulfadiazine磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體包裝5g

Betamethasone Valerate(標準品)英文名稱： Silver Sulfadiazine脊髓灰質炎受體相關蛋白1抗體包裝1g

Betamethasone（標準品）英文名稱： Simvastatin19號染色體開放閱讀框73抗體包裝100g

Bimatoprost（標準品）英文名稱： Simvastatin整合素αM抗體Integrin αM包裝500g

Bleomycin A5 Hydrochloride ...英文名稱： Combretastatin A4 disodium phosphate (CA4P)軸突蛋白4/少突膠質抗體包裝100g

Bortezomib(標準品)英文名稱： Sisomicin Sulfate軸突相關CNTP2蛋白抗體（少突膠質）包裝25g

Budesonide（標準品）英文名稱： Sisomicin Sulfate酪蛋白激酶δ1抗體包裝5g

Candesartan cilexetil(標準品)英文名稱： Somatostatin Acetate活化白粘附分子抗體包裝100g

Carbamazepine（標準品）英文名稱： Streptozocin1號染色體開放閱讀框191抗體包裝25g
實驗報告
一、產分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。