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操作流程如下：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

我司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，凡購(gòu)買我司試劑盒的用戶，只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度，雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期，保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn)，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。

從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)：

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務(wù)必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)。

實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品圖：

40 ng/L，5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20 ng/L，4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10 ng/L，3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

5 ng/L，2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.5 ng/L，1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

標(biāo)本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證"，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測(cè)抗原時(shí)，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；

補(bǔ)體的控制方法：

①用EDTA稀釋標(biāo)本；

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；

2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長(zhǎng)或凝固不全等；

控制方法：采血時(shí)規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管，經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存；保存時(shí)間不宜過久，檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本；對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

Williopsis saturnus var. saturnγ-丁酸A型受體檢測(cè)試劑盒

Pichia subpelliculosa金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白5檢測(cè)試劑盒

Geotrichum candidum屋塵螨特異性IgE抗體檢測(cè)試劑盒

Geotrichum candidum弓形蟲循環(huán)抗原檢測(cè)試劑盒

Geotrichum candidum屋塵螨特異性IgG1抗體檢測(cè)試劑盒

Pichia farinosa屋塵螨特異性IgG2a抗體檢測(cè)試劑盒

Candida guilliermondii亮腦啡肽檢測(cè)試劑盒

Candida guilliermondii var.carpophila白介素1受體樣1檢測(cè)試劑盒

IDO吲哚胺2,3-雙加氧酶酶聯(lián)免疫試劑盒塑料尖底離心管 1.5mlAnti-NR1/NMDAR1/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體1抗體IgG雞原纖維蛋白3(FBN3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

一次性滴管 3ml加長(zhǎng)型 200mmAnti-Phospho-NMDAR1 (Ser890)/FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體1抗體IgG雞組織蛋白D(CTSD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

8-羥喹啉-5-磺 水合物 98%Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體1抗體IgG雞III型膠原交聯(lián)羧端肽(CTX-III)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

亞氨二乙 98%Anti-NR2A/NMDAR2A /FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體2A抗體（N端）IgG雞神經(jīng)降壓素(NT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

羧-β-環(huán)糊精鈉鹽  DS ~7Anti-NR2B/NMDAR2B /FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體2B抗體IgG雞失調(diào)癥蛋白質(zhì)2(ATXN2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

Amberjet? IMAC HP1110 樹脂Anti-NR2A/NMDAR2A/FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體2A抗體IgG雞末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

Amberlite? SR1L , Na-form 樹脂Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1246) /FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體2A抗體IgG雞接觸蛋白相關(guān)蛋白1(CNTNAP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

雙(4-)酯 99%Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) /FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體2A抗體IgG雞成纖維生長(zhǎng)因子23(FGF23)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)氨酰-β-氨 98%Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1070) /FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體2B抗體IgG雞抑肽(AP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4-溴-2-氟 99%Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1472) /FITC  熒光素標(biāo)記化谷氨受體2B抗體IgG雞纖溶-抗纖溶復(fù)合物(PAP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

5-溴-2-氟 97%Anti-NR2C/NMDAR2C /FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體2C抗體IgG雞成纖維生長(zhǎng)因子受體底物3(FRS3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4-溴-2-(三氟氧) 98%Anti-NR2D/NMDAR2D /FITC  熒光素標(biāo)記谷氨受體2D抗體IgG雞多配體聚糖1(SDC1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

5-溴-2-氟三氟 98%Anti-N-ras/FITC  熒光素標(biāo)記原癌因抗體IgG雞白分化抗原CD42 (CD42)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

3-溴-4-三氟 97% Anti-NRF-1/FITC  熒光素標(biāo)記核呼吸因子-1抗體IgG雞L選擇素(SELL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4-溴-2-氟 99%Anti-Nrf2/FITC  熒光素標(biāo)記核因子2相關(guān)因子2抗體IgG雞粘蛋白5B(MUC5B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒