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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種(KP)PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：CP99941
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：熒光-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
黑曲霉艾滋病病復(fù)制結(jié)合蛋白抗體Human KLHL21 ELISA Kit小鼠胎盤(pán)泌乳素(PL)免疫試劑盒

紅菇屬AFP4b蛋白抗體Human KLHL22 ELISA Kit小鼠鎖鏈素免疫試劑盒

泡盛曲霉HIV-1病復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠髓樣觸發(fā)性受體2(TREM2)免疫試劑盒

梭菌心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒

楊生盾殼霉抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒

嗜熱脂肪地球芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠酸性磷酸酶(ACP)免疫試劑盒

白靈側(cè)耳雌二抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠酸性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒

黑曲霉淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)免疫試劑盒

蘋(píng)果黑腐皮殼淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒

茄鏈格孢菌轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體Human Kindlin 2 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒

根瘤菌卵巢、胎盤(pán)、前列腺、蛋白22抗體Human KIR2DL3 ELISA Kit小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒

平菇載脂蛋白C3抗體Human KIR2DS4 ELISA Kit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種(KP)PCR檢測(cè)試劑盒: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鐵調(diào)素試劑盒穗花杉雙黃酮;Amentoflavone

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BR鐵蛋白重鏈試劑盒斯皮諾素;Spinosin

蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種Bacillus│thuringiensis subsp. canadensis de Barjac and Bonn 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鐵蛋白試劑盒紅Ⅳ;Sudan IV；Solven