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咨詢購(gòu)買CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑()，請(qǐng)致電上海莼試生物技術(shù)有限公司，為您提供zui全面周到的產(chǎn)品服務(wù)，除此之外，我公司*以下產(chǎn)品：
中文名稱：CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑()
英文名字：Cell counting KIT-8 (CCK-8) kit
Cell Counting Kit-8 簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)
使用說明：
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)）
1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。
2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做3-5個(gè)細(xì)胞濃度梯度，每組3-6個(gè)復(fù)孔。
3、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測(cè)定OD 值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸），OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測(cè)定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要*，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時(shí)間。）
CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑()二、細(xì)胞活性檢測(cè)
1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在37℃,5% CO2的條件下）。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。
4、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。
5、如果暫時(shí)不測(cè)定OD值，打算以后測(cè)定的話，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
三、細(xì)胞增值-毒性檢測(cè)
1、在96孔板中配置100 μL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（在37 ℃，5% CO2的條件下）。
2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6、12、24或48小時(shí)）。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。
4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。
5、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度。
6、如果暫時(shí)不測(cè)定OD 值，打算以后測(cè)定的話，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
活力計(jì)算：.
細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0加藥)－A(空白)]×100
A（加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A（0 加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑()注意事項(xiàng)：
①建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。
②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96 孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為1 ,000個(gè)/孔 (100 μL培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此接種量不低于2,500 個(gè)/孔 ( 100 μL培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10% 加入CCK-8溶液。
④如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之間的濾光片，但是450nm檢測(cè)靈敏度zui高。
⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。 
注意事項(xiàng)
1、 TTC 溶液若變成紅色則不可再用。
2、 顯色時(shí)要使種子全部浸入 TTC 染色液中。
3、 TCC 染色后應(yīng)立即觀察，不可久放。  
4、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作安全。
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。
2、*次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3. 使用前請(qǐng)先檢查溶液P2、P3和P4是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。
4. 洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50ul，體積過小影響回收效率；洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影晌，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)， pH值低于7. 0會(huì)降低洗脫效率。 DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。
5. 質(zhì)粒DNA濃度＞1mg/ml時(shí)清除內(nèi)毒素效率降低。由于質(zhì)粒DNA本身的性質(zhì)，清除過程可導(dǎo)致部分質(zhì)粒DNA丟失，但內(nèi)毒素卻能得到zui大限度清除。
6. 所有溶液應(yīng)用無內(nèi)毒素的高純水配制，所有器械材料均應(yīng)不含內(nèi)毒素，玻璃器皿可高溫烘烤，非揮發(fā)性水溶液可高壓處理。
7. DNA濃度及純度檢測(cè)：得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 得到的DNA可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。 DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響吸光值，但并不表示純度低。

(變性)
POSTN     Others    Human    人 OSF2 / POSTN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
FGFR4     Others    Mouse    小鼠 FGFR4 / CD334 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
IL13RA2     Others    Mouse    小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PLAUR     Others    Mouse    小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
SLAMF1     Others    Human    人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
KIRREL     Others    Mouse    小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LDLR     Others    Mouse    小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LAMP3     Others    Human    人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
P4HB     Others    Human    人 P4HB / ERBA2L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
FGFR1     Others    Human    人 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
TGFBI     Others    Human    人 BIGH3 / BIG-H3 / TGFBI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
FIGF     Others    Human    人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
VEGFC     Others    Human    人 VEGF-C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
TNFRSF8     Others    Human    人 CD30 / TNFRSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
HAVCR1     Others    Human    人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
TFPI2     Others    Human    人 TFPI2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
TCN2     Others    Human    人 TCN2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
SIGIRR     Others    Mouse    小鼠 SIGIRR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PDCD1     Others    Mouse    小鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PCSK9     Others    Rhesus    恒河猴 PCSK9 / NARC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑()MBL1     Others    Mouse    小鼠 MBL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
ERAP2     Others    Human    人 LRAP / ERAP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LIFR     Others    Human    人 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LEFTY2     Others    Human    人 Lefty A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
LDLR     Others    Human    人 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽