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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦA的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱     293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦA        
形態(tài)特性      上皮樣        
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)        
特征特性               
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
傳代方法      1:2~1:3傳代。        
傳代情況     C3        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法（-）         
STR      Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：11，12，13，14；D16S539：9，13；D18S51：17，18，19；D19S433：17，18；D21S11：27，28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，16，17；D5S818：8，10；D7S820：11；D8S1179：12，15；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，18，19，20；        
同工酶             
染色體             
使用權(quán)限     B類    
293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦA培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

CSF3     cDNA    Human    人 GCSF 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
CD47     cDNA    Human    人 CD47 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
RELA     cDNA    Human    人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
SDC1     cDNA    Human    人 SDC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CHI3L1     cDNA    Human    人 CHI3L1 / YKL40 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
LGALS9     cDNA    Human    人 LGALS9 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MMP14     cDNA    Human    人 MMP-14 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
PTN     cDNA    Human    人 Pleiotrophin / PTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
PTN     cDNA    Human    人 Pleiotrophin / PTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
MDK     cDNA    Human    人 MDK / NEGF2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
CDH1     cDNA    Human    人 E-Cadherin 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
EIF2A     cDNA    Human    人 eIF2a 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
TNFRSF9     cDNA    Human    人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
BMPR1A     cDNA    Rat    大鼠 BMPR1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SIRT3     cDNA    Mouse    小鼠 SIRT3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
SIRT3     cDNA    Mouse    小鼠 SIRT3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
293來源病毒包裝細(xì)胞；ΦACA12     cDNA    Human    人 CA XII 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
BMPR1A     cDNA    Human    人 ALK-3 / BMPRIA 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MDK     cDNA    Human    人 MDK / NEGF2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
DLL1     cDNA    Mouse    小鼠 DLL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽