上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-01 09:20:07瀏覽次數(shù):375
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細(xì)胞名稱 婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性婆羅門牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4實(shí)驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
MRPL28 cDNA Rat 大鼠 MRPL28 基因全長ORF克隆
RPS18 cDNA Rat 大鼠 RPS18 基因全長ORF克隆
TNNC2 cDNA Rat 大鼠 TNNC2 基因全長ORF克隆
HBB-B1 cDNA Rat 大鼠 HBB-B1 基因全長ORF克隆
ODAM cDNA Rat 大鼠 ODAM 基因全長ORF克隆
CD9 cDNA Rat 大鼠 CD9 基因全長ORF克隆
TBPL1 cDNA Rat 大鼠 TBPL1 基因全長ORF克隆
MRPS7 cDNA Rat 大鼠 MRPS7 基因全長ORF克隆
PPP1CB cDNA Rat 大鼠 PPP1CB 基因全長ORF克隆
HOPX cDNA Rat 大鼠 HOPX 基因全長ORF克隆
TMBIM6 cDNA Rat 大鼠 TMBIM6 基因全長ORF克隆
SDHB cDNA Rat 大鼠 SDHB 基因全長ORF克隆
FDPS cDNA Rat 大鼠 FDPS 基因全長ORF克隆
LOC100134871 cDNA Rat 大鼠 LOC100134871 基因全長ORF克隆
RPL3 cDNA Rat 大鼠 RPL3 基因全長ORF克隆
SH3BGRL3 cDNA Rat 大鼠 SH3BGRL3 基因全長ORF克隆
PPIA cDNA Rat 大鼠 PPIA 基因全長ORF克隆
CKS1L cDNA Rat 大鼠 CKS1L 基因全長ORF克隆
PSME1 cDNA Rat 大鼠 PSME1 基因全長ORF克隆
H2AFZ cDNA Rat 大鼠 H2AFZ 基因全長ORF克隆
BTF3 cDNA Rat 大鼠 BTF3 基因全長ORF克隆
AGTRAP cDNA Rat 大鼠 AGTRAP 基因全長ORF克隆
SARNP cDNA Rat 大鼠 SARNP 基因全長ORF克隆
ANAPC11 cDNA Rat 大鼠 ANAPC11 基因全長ORF克隆
COX4I1 cDNA Rat 大鼠 COX4I1 基因全長ORF克隆
LOC100911902 cDNA Rat 大鼠 LOC100911902 基因全長ORF克隆
GSTM2 cDNA Rat 大鼠 GSTM2 基因全長ORF克隆
APEX1 cDNA Rat 大鼠 APEX1 基因全長ORF克隆
TRUB2 cDNA Rat 大鼠 TRUB2 基因全長ORF克隆
CYB5A cDNA Rat 大鼠 CYB5A 基因全長ORF克隆
GPX2 cDNA Rat 大鼠 GPX2 基因全長ORF克隆
NAT9 cDNA Rat 大鼠 NAT9 基因全長ORF克隆
ATP5C1 cDNA Rat 大鼠 ATP5C1 基因全長ORF克隆
TRAPPC5 cDNA Rat 大鼠 TRAPPC5 基因全長ORF克隆
PSMA7 cDNA Rat 大鼠 PSMA7 基因全長ORF克隆
RPL4 cDNA Rat 大鼠 RPL4 基因全長ORF克隆
MFAP2 cDNA Rat 大鼠 MFAP2 基因全長ORF克隆
EIF3I cDNA Rat 大鼠 EIF3I 基因全長ORF克隆
RGD1562987 cDNA Rat 大鼠 RGD1562987 基因全長ORF克隆
FKBP3 cDNA Rat 大鼠 FKBP3 基因全長ORF克隆
RPS5 cDNA Rat 大鼠 RPS5 基因全長ORF克隆
GINS4 cDNA Rat 大鼠 GINS4 基因全長ORF克隆
SUMO2 cDNA Rat 大鼠 SUMO2 基因全長ORF克隆
RGS19 cDNA Rat 大鼠 RGS19 基因全長ORF克隆
IFITM3 cDNA Rat 大鼠 IFITM3 基因全長ORF克隆
FABP3 cDNA Rat 大鼠 FABP3 基因全長ORF克隆
MEF2BNB cDNA Rat 大鼠 MEF2BNB 基因全長ORF克隆
S100A16 cDNA Rat 大鼠 S100A16 基因全長ORF克隆
ARHGDIB cDNA Rat 大鼠 ARHGDIB 基因全長ORF克隆
MRAP cDNA Rat 大鼠 MRAP 基因全長ORF克隆
SMIM14 cDNA Rat 大鼠 SMIM14 基因全長ORF克隆
LOC171573 cDNA Rat 大鼠 LOC171573 基因全長ORF克隆