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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供大額牛腎細胞；BFR-K1的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細胞名稱     大額牛腎細胞；BFR-K1        
形態(tài)特性      上皮樣        
生長特性     貼壁生長        
特征特性      該細胞系來源于一雄性新生大額牛的腎組織。2000年由昆明細胞庫建立。         
培養(yǎng)條件      M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS        
傳代方法      1：2傳代；3-4天一次        
傳代情況     P2        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     熒光法（-）         
STR      -        
同工酶             
染色體             
使用權(quán)限     B類    
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

CD86     cDNA    Mouse    小鼠 B7-2 / CD86 基因全長ORF克隆
TNFSF9     cDNA    Mouse    小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 基因全長ORF克隆
SERPINB10     cDNA    Mouse    小鼠 Serpinb10 基因全長ORF克隆
CTLA4     cDNA    Mouse    小鼠 CTLA4 基因全長ORF克隆
CADM3     cDNA    Mouse    小鼠 CADM3 基因全長ORF克隆
KNG1     cDNA    Mouse    小鼠 KNG1 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆
JAM3     cDNA    Mouse    小鼠 JAM3 基因全長ORF克隆
JAM2     cDNA    Mouse    小鼠 JAM2 基因全長ORF克隆
PRLR     cDNA    Mouse    小鼠 PRLR 基因全長ORF克隆
POSTN     cDNA    Mouse    小鼠 POSTN 基因全長ORF克隆
MDGA2     cDNA    Mouse    小鼠 MDGA2 基因全長ORF克隆
LIFR     cDNA    Mouse    小鼠 LIFR 基因全長ORF克隆
BCHE     cDNA    Mouse    小鼠 BCHE 基因全長ORF克隆
CRP     cDNA    Mouse    小鼠 CRP 基因全長ORF克隆
PECAM1     cDNA    Mouse    小鼠 CD31 / PECAM1 基因全長ORF克隆
ENG     cDNA    Mouse    小鼠 ENG 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆
CD7     cDNA    Mouse    小鼠 CD7 基因全長ORF克隆
GLO1     cDNA    Mouse    小鼠 GLO1 基因全長ORF克隆
PPIA     cDNA    Mouse    小鼠 PPIA 基因全長ORF克隆
HPX     cDNA    Mouse    小鼠 HPX 基因全長ORF克隆
PILRA     cDNA    Mouse    小鼠 PILRA 基因全長ORF克隆
SERPINB8     cDNA    Mouse    小鼠 Serpinb8 基因全長ORF克隆
IFNAR1     cDNA    Mouse    小鼠 IFNAR1 基因全長ORF克隆
THY1     cDNA    Mouse    小鼠 THY1 基因全長ORF克隆
OMD     cDNA    Mouse    小鼠 OMD 基因全長ORF克隆
TNFRSF10B     cDNA    Mouse    小鼠 TNFRSF10B / TRAILR2 基因全長ORF克隆
THSD1     cDNA    Mouse    小鼠 THSD1 基因全長ORF克隆
TIMP1     cDNA    Mouse    小鼠 TIMP1 基因全長ORF克隆
ELANE     cDNA    Mouse    小鼠 ELANE / ELA2 基因全長ORF克隆
ACVR2A     cDNA    Mouse    小鼠 ACVR2A 基因全長ORF克隆
EFNB2     cDNA    Mouse    小鼠 EFNB2 基因全長ORF克隆
CD36     cDNA    Mouse    小鼠 CD36 基因全長ORF克隆
CTSA     cDNA    Mouse    小鼠 CTSA 基因全長ORF克隆
MIF     cDNA    Mouse    小鼠 MIF 基因全長ORF克隆
LYVE1     cDNA    Mouse    小鼠 LYVE-1 基因全長ORF克隆
OGN     cDNA    Mouse    小鼠 OGN 基因全長ORF克隆
MBL2     cDNA    Mouse    小鼠 MBL 基因全長ORF克隆
LY86     cDNA    Mouse    小鼠 LY86 / MD-1 基因全長ORF克隆
IL13RA2     cDNA    Mouse    小鼠 IL13Ra2 基因全長ORF克隆
LCN2     cDNA    Mouse    小鼠 LCN2 / NGAL 基因全長ORF克隆
CSF1R     cDNA    Mouse    小鼠 MCSFR / CSF1R 基因全長ORF克隆
ITGA11     cDNA    Mouse    小鼠 Integrinalpha11 基因全長ORF克隆
MEP1A     cDNA    Mouse    小鼠 MEP1A 基因全長ORF克隆
SFRP5     cDNA    Mouse    小鼠 sFRP-5 基因全長ORF克隆
IL34     cDNA    Mouse    小鼠 IL34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
ITGB1     cDNA    Mouse    小鼠 Integrinbeta1 基因全長ORF克隆
SFRP4     cDNA    Mouse    小鼠 sFRP-4 基因全長ORF克隆
SCARB2     cDNA    Mouse    小鼠 SCARB2 基因全長ORF克隆