上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:36:32瀏覽次數(shù):374
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細(xì)胞名稱 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性黃牛的皮膚組織。2004年由昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
SFTPD cDNA Mouse 小鼠 SFTPD 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PLA2G2A cDNA Mouse 小鼠 PLA2G2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
REG4 cDNA Mouse 小鼠 REG4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SLAMF7 cDNA Mouse 小鼠 SLAMF7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MESDC2 cDNA Mouse 小鼠 MESDC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
C1QBP cDNA Mouse 小鼠 C1QBP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF13 cDNA Mouse 小鼠 FGF13 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF10 cDNA Mouse 小鼠 FGF10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
COLEC11 cDNA Mouse 小鼠 COLEC11 / CL-K1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGFR4 cDNA Mouse 小鼠 FGFR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
KIRREL cDNA Mouse 小鼠 KIRREL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CDH5 cDNA Mouse 小鼠 CD144 / CDH5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD38 cDNA Mouse 小鼠 CD38 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ICOSLG cDNA Mouse 小鼠 B7-H2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
COLEC10 cDNA Mouse 小鼠 COLEC10 / CLL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD1d1 cDNA Mouse 小鼠 CD1D1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VSIG4 cDNA Mouse 小鼠 VSIG4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGFR1 cDNA Mouse 小鼠 FGFR1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
REG3A cDNA Mouse 小鼠 REG3A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NAAA cDNA Mouse 小鼠 NAAA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF16 cDNA Mouse 小鼠 FGF16 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGFRL1 cDNA Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL8 cDNA Mouse 小鼠 CCL8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF14 cDNA Mouse 小鼠 FGF14 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF1 cDNA Mouse 小鼠 aFGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL1 cDNA Mouse 小鼠 CCL1 / TCA3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF18 cDNA Mouse 小鼠 FGF18 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ARTN cDNA Mouse 小鼠 ARTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFSF12 cDNA Mouse 小鼠 TNFSF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACVR2B cDNA Mouse 小鼠 ACVR2B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HBEGF cDNA Mouse 小鼠 HBEGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RBP4 cDNA Mouse 小鼠 RBP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TMEFF2 cDNA Mouse 小鼠 TMEFF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GFRA2 cDNA Mouse 小鼠 GFRA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SERPINF2 cDNA Mouse 小鼠 SERPINF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFSF10 cDNA Mouse 小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GDF10 cDNA Mouse 小鼠 BMP-3b / GDF-10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GDF1 cDNA Mouse 小鼠 GDF-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VCAM1 cDNA Mouse 小鼠 CD106 / VCAM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TWSG1 cDNA Mouse 小鼠 TWSG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TLR3 cDNA Mouse 小鼠 TLR3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PLAUR cDNA Mouse 小鼠 PLAUR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VEGFA cDNA Mouse 小鼠 VEGF-A 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VEGFB cDNA Mouse 小鼠 VEGF-B 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆