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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格，ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間：2017-06-01 09:39:50瀏覽次數(shù)：368
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細(xì)胞名稱(chēng) 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞；NBLE
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 北京眼科研究所建系細(xì)胞。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20～30%FBS
傳代方法 1:2傳代；3~4天1次。
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
新生牛眼晶體上皮細(xì)胞；NBLE實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱(chēng)稱(chēng)量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
CD99L2 cDNA Mouse 小鼠 CD99L2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IFNA2 cDNA Mouse 小鼠 IFNA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DKK2 cDNA Mouse 小鼠 DKK2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DLL1 cDNA Mouse 小鼠 DLL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ST14 cDNA Mouse 小鼠 Matriptase / ST14 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD99 cDNA Mouse 小鼠 CD99 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SERPINA3N cDNA Mouse 小鼠 SERPINA3N 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SCARA5 cDNA Mouse 小鼠 SCARA5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CES2 cDNA Mouse 小鼠 CES2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
F11 cDNA Mouse 小鼠 MERTK 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF5 cDNA Mouse 小鼠 FGF5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NTN3 cDNA Mouse 小鼠 NTN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD19 cDNA Mouse 小鼠 CD19 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NRP1 cDNA Mouse 小鼠 Neuropilin-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMP3 cDNA Mouse 小鼠 BMP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL20RB cDNA Mouse 小鼠 IL20RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMPER cDNA Mouse 小鼠 BMPER 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RLN3 cDNA Mouse 小鼠 RLN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LY9 cDNA Mouse 小鼠 LY9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TLR2 cDNA Mouse 小鼠 CD282 / TLR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CADM4 cDNA Mouse 小鼠 CADM4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRSS3 cDNA Mouse 小鼠 PRSS3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFAIP6 cDNA Mouse 小鼠 TNFAIP6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TPSAB1 cDNA Mouse 小鼠 TPSAB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF1A cDNA Mouse 小鼠 TNFRSF1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SPARC cDNA Mouse 小鼠 SPARC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MMP8 cDNA Mouse 小鼠 MMP-8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MMP7 cDNA Mouse 小鼠 MMP-7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD180 cDNA Mouse 小鼠 CD180 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF11A cDNA Mouse 小鼠 TNFRSF11A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
AGER cDNA Mouse 小鼠 AGER 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RETN cDNA Mouse 小鼠 RETN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
KITLG cDNA Mouse 小鼠 SCF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD209B cDNA Mouse 小鼠 CD209B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CLU cDNA Mouse 小鼠 CLU 基因全長(zhǎng)ORF克隆
S100A4 cDNA Mouse 小鼠 S100A4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SIRT5 cDNA Mouse 小鼠 SIRT5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
