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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人類成纖維細胞系；CNLMG-B5538SKIN
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細胞名稱  人類成纖維細胞系；CNLMG-B5538SKIN  
形態(tài)特性   成纖維細胞樣　  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS  
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次  
傳代情況  C8  
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    

使用權限  未定 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
2）含量：>5x105 個/mL  
肝kuffer細胞  
細胞詳述  
肝kuffer細胞位于肝血竇腔內，具有變形運動和活躍的吞噬功能，還具有處理和傳遞抗原、調節(jié)機體免疫應答等作用，屬單核吞噬細胞系統(tǒng)主要成員。是清除細菌及其毒素從而拮抗感染的重要防御細胞，同時也通過釋放各種炎癥介質，在內毒素性肝損傷的發(fā)生中發(fā)揮主導作用 。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常肝組織。  
2)細胞鑒定：巨噬細胞標志物（F4/80）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：圓形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
角膜基質細胞  
細胞詳述  
角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同，部zui薄。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。  
角膜基質為中層結締組織，*透明，角膜基質層中的主要細胞成分是角膜基質細胞，它能合成和分泌纖維，并且對膠原束的排列和平衡都起作用。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。  
2)細胞鑒定：波形蛋白（imentin）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
視網膜色素上皮細胞  
細胞詳述  
視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。  
2)細胞鑒定：細胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
晶狀體上皮細胞  

細胞詳述  
哺乳動物的晶狀體主要由兩種細胞組成：形成主體的晶狀體纖維細胞和一層覆蓋在晶狀體前表面的單層上皮細胞。晶狀體上皮細胞主要負責調節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內部，產生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并zui終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長子的調控，包括表皮生長子和胰島素等。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。  
2)細胞鑒定：細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
結膜成纖維細胞  
細胞詳述  
結膜松弛癥（conjunctiochalasis，CCh）是由于球結膜過度松弛和（或）下瞼緣張力高，造成松弛球結膜堆積在眼球與下瞼緣、內外眥部之間，形成皺褶，引起眼表淚液分布異常，并伴有眼部不適如流淚、干澀、異物感等癥狀的眼病。有研究表明結膜松弛癥中結膜成纖維細胞的改變，影響細胞外基質成分的平衡狀態(tài)和穩(wěn)定性，可能是結膜松弛癥發(fā)生的原。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的眼球。  
2)細胞鑒定：結蛋白（Desmin）或波形蛋白（imentin）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
結膜上皮細胞  
細胞詳述  
結膜上皮是眼表的重要組成部分，是眼表的保護屏障，在維持淚膜的穩(wěn)定性、潤滑眼表、維持正常視力和眼表上皮損傷修復中發(fā)揮重要作用。上世紀90 年代，隨著人們對眼表的深入研究，提出了結膜上皮干細胞的概念，認為結膜上皮細胞的自我更新來自結膜上皮干細胞。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的眼球。  
2)細胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式：扁平的橢圓形、梭形或不規(guī)則形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。  
脈絡膜微血管內皮細胞