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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細胞的訂購信息：

英文簡稱：Calu-6 細胞    

產(chǎn)品名稱：肺退行性癌細胞

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮細胞

生長特性：貼壁生長

特征特性：1976年分離得到。

培養(yǎng)條件：EMEM+10%FBS

傳代方法：消化20分鐘。1:2。5-6天長滿。

貨號：CS-X64026

注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞在對數(shù)生，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
實驗報告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大小；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
溶血酰基轉(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)檢測試劑盒英文名稱：LPCAT3 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因6抗體包裝25g

溶血?；D(zhuǎn)移酶2(LPCAT2)檢測試劑盒英文名稱：LPCAT2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框2抗體包裝25mg

溶血?；D(zhuǎn)移酶1(LPCAT1)檢測試劑盒英文名稱：LPCAT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框86抗體包裝25G

溶血磷脂酸受體3(LPAR3)檢測試劑盒英文名稱：LPAR3 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框128抗體包裝5G

溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)檢測試劑盒英文名稱：ACP2 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框62抗體包裝100g

妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)檢測試劑盒英文名稱：PAPPA ELISA KitCCZ1蛋白抗體包裝500g

熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測試劑盒英文名稱：HSF4 ELISA Kit腦蛋白5抗體包裝1g

熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)檢測試劑盒英文名稱：HSF1 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g

熱休克蛋白β8(HSPβ8)檢測試劑盒英文名稱：HSPβ8 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框43抗體包裝1g

熱休克蛋白β6(HSPβ6)檢測試劑盒英文名稱：HSPβ6 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測試劑盒英文名稱：HSPβ2 ELISA Kit幾丁質(zhì)酶3樣蛋白3抗體包裝100ml

熱休克蛋白40(HSP40)檢測試劑盒英文名稱：HSP40 ELISA Kit趨化素樣因子超家族成員2抗體包裝500ml

染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)檢測試劑盒英文名稱：CHAF1B ELISA Kit趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體包裝1g

染色質(zhì)域解旋酶DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)檢測試劑盒英文名稱：CHD4 ELISA Kit18號染色體開放閱讀框1抗體包裝5g

染色框同源物3(CBX3)檢測試劑盒英文名稱：CBX3 ELISA Kit色素c氧化酶VIIA亞型2抗體包裝100g
Calu-6 細胞腦啡肽原B(PDYN)檢測試劑盒英文名稱：PDYN ELISA Kit乙脫氫酶2型抗體包裝5g

腦啡肽原A(PENK)檢測試劑盒英文名稱：PENK ELISA Kitγ-氨基丁酸脫氫酶抗體包裝1g

腦腸肽(Gehrelin)檢測試劑盒英文名稱：Gehrelin ELISA Kit衰老相關(guān)蛋白5抗體包裝25g

腦腸肽(BGP/Gehrelin)檢測試劑盒英文名稱：BGP/Gehrelin ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體包裝5g

末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)檢測試劑盒英文名稱：TCC C5b-9 ELISA Kit釉基質(zhì)蛋白抗體包裝1g

膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)檢測試劑盒英文名稱：ANX-Ⅴ ELISA Kit磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體包裝25g

繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管(AMH)檢測試劑盒英文名稱：AMH ELISA Kit磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體包裝5g

苗條素受體(LR/Ob-R)檢測試劑盒英文名稱：LR/Ob-R ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝1g

球蛋白M(IgM)檢測試劑盒英文名稱：IgM ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝5g

球蛋白G4(IgG4)檢測試劑盒英文名稱：IgG4 ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝1g

球蛋白G2(IgG2)檢測試劑盒英文名稱：IgG2 ELISA Kit磷酸化雄受體抗體包裝5g

球蛋白G1(IgG1)檢測試劑盒英文名稱：IgG1 ELISA Kit錨定蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體包裝1g

球蛋白G(IgG)檢測試劑盒英文名稱：IgG ELISA Kit磷酸化內(nèi)收蛋白抗體包裝25g

球蛋白E(IgE)檢測試劑盒英文名稱：IgE ELISA Kit膜粘連蛋白11抗體包裝5g

球蛋白D(IgD)檢測試劑盒英文名稱：IgD ELISA Kit膜粘連蛋白13抗體包裝100mg