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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：布尼亞病毒（BV）PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：CP99974
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：熒光-PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
樹舌1-2磷酸化B-Raf抗體Human GSTM4 ELISA Kit小鼠雌二(E2)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌癌易感基因相互作用蛋白1抗體Human GSTO2 ELISA Kit小鼠垂草扁桃酸(VMA)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌磷酸化癌易感基因相互作用蛋白1抗體Human GSTM5 ELISA Kit小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)免疫試劑盒

多形環(huán)紋炭團菌磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體Human GSTZ1 ELISA Kit小鼠程序性死亡1(PD-1)免疫試劑盒

友好戈登氏菌磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體Human GSTT2B ELISA Kit小鼠成纖維生長因子9(FGF9)免疫試劑盒

瑞士乳桿菌磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體Human GSX1 ELISA Kit小鼠成纖維生長因子8(FGF8)免疫試劑盒

麥芽糖假絲酵母磷酸化B-Raf抗體Human GRK3 ELISA Kit小鼠成纖維生長因子6(FGF6)免疫試劑盒

粗糙脈孢菌磷酸化B-Raf抗體Human GRK5 ELISA Kit小鼠成纖維生長因子4(FGF4)免疫試劑盒

德夸菌素鏈霉菌磷酸化Bcl-xL蛋白抗體Human Mortalin(75 kDa glucose-regulated protein) ELISA Kit小鼠成纖維生長因子13(FGF-13)免疫試劑盒

禾谷絲核菌高表達神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體Human GTDC1 ELISA Kit小鼠成纖維生長因子10(FGF10)免疫試劑盒

兩型蠟蚧菌B遷移基因4抗體Human GRK6 ELISA Kit小鼠成神經(jīng)瘤RAS 病(v-ras)癌基因同源物免疫試劑盒

葡萄牙棒孢酵母BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體Human GRPEL1 ELISA Kit小鼠超氧化物歧化酶(SOD)免疫試劑盒

禾谷絲核菌大腦蛋白2抗體Human GSDMD ELISA Kit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒

伊平屋橋大洋芽孢桿菌B轉(zhuǎn)錄激活因子抗體Human GRWD1 ELISA Kit小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒

白僵菌BCL6B抗體Human GSDMB ELISA Kit小鼠長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)免疫試劑盒

交鏈孢霉BAP31蛋白抗體Human GSPT1 ELISA Kit小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)免疫試劑盒
布尼亞病毒（BV）PCR檢測試劑盒: Amycolatopsis keratiniphila subsp. keratiniphila 質(zhì)量規(guī)格：>99%羥甲基戊二酸單酰試劑盒毛地黃素;Digitaline

傳染性喉氣管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品羥基賴正己氨酸試劑盒麥芽糖;Maltose

熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,可用于培養(yǎng)羥試劑盒沒食子兒茶素;(-)-Gallocate

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品強啡肽試劑盒木糖;D-Xylose

水蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2試劑盒3-O-沒食子酰粘酸;3-O-gallo

天門冬擬莖點霉Phomopsis│asparagi (Sacc.) Grove 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水合物潛伏膜蛋白1試劑盒木犀草素-5-O-葡萄糖苷;Luteol

土壤桿菌Agrobacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品前心鈉肽試劑盒麥冬皂苷C;Ophiopogonin C

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR前纖維蛋白1抗體elisa試劑盒麥冬皂苷A;Ophiopogonin A