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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因植物Bar基因PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：CP100014
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：熒光-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR（見下步），每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
粉被馬利婭霉幾丁質(zhì)酶3樣蛋白3抗體Human EFHD1 ELISA Kit兔型纖溶酶原激活物(uPA)免疫試劑盒

副豬嗜血桿菌趨化素樣因子超家族成員2抗體Human EIF3C ELISA Kit兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)免疫試劑盒

貝倫格葡萄座腔菌趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體Human EFTUD1 ELISA Kit兔末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒

芽孢桿菌18號(hào)染色體開放閱讀框1抗體Human EFS ELISA Kit兔淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒

檸檬酸桿菌色素c氧化酶VIIA亞型2抗體Human EFTUD2 ELISA Kit兔粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒

黃曲霉鈣離子通道a1F亞型抗體Human EFHA1 ELISA Kit兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)免疫試劑盒

黃粘蓋肝菌鈣調(diào)磷酸酶B亞基B1抗體Human EFHC1 ELISA Kit兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒

宇佐美曲霉鈣調(diào)蛋白激酶激酶α抗體CaMKKαHuman EIF1 ELISA Kit兔抗平滑肌抗體(ASMA) 免疫試劑盒

彎孢菌環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體Human EFHD1 ELISA Kit兔抗III(SERPINC1)免疫試劑盒

雜色曲霉磷酸化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體Human EFS ELISA Kit兔抗腦組織抗體(ABAb)免疫試劑盒

肺形側(cè)耳鈣激活蛋白酶12抗體Human Eg5 ELISA Kit兔抗內(nèi)皮抗體(AECA)免疫試劑盒

Au141（黑木耳）20號(hào)染色體開放閱讀框134抗體Human EFTUD2 ELISA Kit兔抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒

廣食黃桿菌B粘附分子CD239抗體Human EHBP1 ELISA Kit兔膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒

聚生殼菌胰羧肽酶B2抗體Human EHD1 ELISA Kit兔降鈣素原(PCT)免疫試劑盒

草假單胞菌視網(wǎng)膜色素變性蛋白26抗體Human EFTUD1 ELISA Kit兔降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

松口蘑過(guò)氧化物酶體肉堿?；D(zhuǎn)移酶抗體Human EFHA1 ELISA Kit兔甲狀旁腺激素(PTH)免疫試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因PCR檢測(cè)試劑盒隔指孢Dactylella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR抗著絲點(diǎn)抗體試劑盒甘草酸二;Dipotassium gl

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量≥99.0%(HPLC)抗轉(zhuǎn)谷氨酰酶抗體試劑盒戈米辛J;Gomisin J

孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗轉(zhuǎn)谷氨酰酶抗體試劑盒瓜氨酸;L(+)-Citrulline

神戶類芽孢桿菌Paenibacillus│kobensis 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC),BR,可用于培養(yǎng)抗中性粒核周抗體試劑盒根薯酮內(nèi)酯B;Taccalonolide

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP33,BR抗中性粒胞漿抗體試劑盒根薯酮內(nèi)酯A;Taccalonolide

北里鏈霉菌Streptomyces│kitasatoensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗中性粒/中心體抗體試劑盒D-果糖;D(-)-Fructose

病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR抗增殖核抗原試劑盒廣藿香酮;Pogostone

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗硬皮病抗體70試劑盒骨化三;Calcifediol

芽孢桿菌Bacillus│atrophaeus 質(zhì)量規(guī)格：CP抗抑制素B抗體試劑盒骨化二;Calcifediol