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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠肺泡巨噬細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠肺泡巨噬分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲存器官，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肺泡巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肺泡巨噬采用機械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠羥脯酸(Hyp)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human talin (Gelson) ELISA Kit 人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒

Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit 人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISA試劑盒豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒20次

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠流行性出血熱抗體（EHF-Ab）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰合酶(HMGCS)ELISA試劑盒 ，英文名： HMGCS ELISA Kit

Mouse somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒

MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體規(guī)格：48T/96T

通用型豬沙門氏菌(SwineSalmonella)試劑盒20次

ELISAKitvisfatin大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格：48T/96T

IL34重組小鼠 IL-34 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原 0.5mgCeruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原

ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form) Protein

CROT Protein Human 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原 0.5mgCeruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原

CROT Protein Human 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)

IL34重組小鼠 IL-34 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。