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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠骨外膜分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞，稱(chēng)為成骨細(xì)胞，這種細(xì)胞具有使骨骼生長(zhǎng)的功能。在骨外膜中還有另外一種專(zhuān)門(mén)破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞，稱(chēng)為破骨細(xì)胞。這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細(xì)胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu)，并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下，兩種細(xì)胞之間處于動(dòng)態(tài)的平衡之中，完成骨的生長(zhǎng)發(fā)育的新陳代謝。骨折之后，成骨細(xì)胞首先啟動(dòng)，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性，往往不符合生物力學(xué)的需要，改建塑形的過(guò)程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒

HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISA試劑盒人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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Humansteroidproducingcellaoaibody,SCAELISAKit人抗類(lèi)固醇生成細(xì)胞抗體(SCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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大鼠纖維連接蛋白(FN)ELISA試劑盒 ，英文名： FN ELISA Kit

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Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPeptideYYELISAKit人多肽YY規(guī)格：48T/96

同位素[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitxR大鼠硫氧還蛋白還原酶規(guī)格：48T/96

DARS重組人 DARS 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

STAT3(signal transducers and activators of transduction3 0.5mgSTAT3(signal transducers and activators of transduction3) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原

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YWHAE重組人 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用