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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠角膜基質(zhì)分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分，占據(jù)角膜厚度的90%，由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點(diǎn)，正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分，維持角膜的透明度，此細(xì)胞對(duì)于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下，處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí)，不同上皮來源的因子及環(huán)境信號(hào)，將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng)，決定著角膜能否被修復(fù)。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒

Humanmembranecofactorprotein,MCPELISAKit 人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanacetylcholine,ACHELISA試劑盒人乙酰(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常人體腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒 ，英文名： α Actin ELISA Kit

Mouse prolactin (PRL) ELISA Kit 小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血小板生長因子受體α(mouse PDGF sRα) 48T/96 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIg-j(Humanimmunoglubinjoiningchain)ELISAKitj鏈規(guī)格：48T/96

通用型牛傳染性鼻氣管炎(InfectiousBovineRhinoacheitis;IBR/ BovineHerpesvirus-1;BHV-1)試劑盒20次

ELISAKitCT-1大鼠心肌營養(yǎng)素1規(guī)格：48T/96

CD2重組狗 CD2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Newcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒 1mlNewcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)

CD83重組人 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CTRL Protein Human 重組人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞Newcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒 1mlNewcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)

CTRL Protein Human 重組人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD2重組狗 CD2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白

CD83重組人 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用