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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠口腔上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞，呈扁平、多邊形，形狀不規(guī)則。口腔各壁都有黏膜覆蓋，口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動(dòng)?；讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂增生，以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細(xì)血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 48T/96 試劑盒 組裝/原裝

Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒

humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISA試劑盒人抗0脂酰絲抗體(APSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次

HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子   英文名稱：   macrophage migration inhibitory factor   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   MIF

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 1   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   MIP-1

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 2   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   MIP-2

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 3α   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   MIP-3α

大鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)ELISA試劑盒 ，英文名： LOX1 ELISA Kit

Mouse platelet membrane glycoprotein B II (GP- II III a B III a/CD41+CD6 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6

RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHELISAKit大鼠釋放激素規(guī)格：48T/96

細(xì)胞酶3(PON3)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白

VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠口腔上皮細(xì)胞BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。