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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴(yán)格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠皮層神經(jīng)元細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠皮層神經(jīng)元分離自腦皮層組織；皮層神經(jīng)元細胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞，它由細胞體和細胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘，組成神經(jīng)纖維，它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢。細胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中，細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細胞體是細胞含核的部分，其形狀大小有很大差別，直徑約4-120微米。核大而圓，位于細胞中央，染色質(zhì)少，核仁明顯。細胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì)，還有許多神經(jīng)元纖維。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分，又可分為樹突和軸突。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突，可以接受刺激并將興奮傳入細胞體。每個神經(jīng)元只有一個軸突，可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織，如肌肉或腺體。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細胞之一，是大腦進行功能活動調(diào)節(jié)的基本單位，參與動物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開始；突起逐漸增多，而后突起進一步增多并逐漸成網(wǎng)，同時細胞胞體增大，周邊光暈明顯。10-12d細胞為豐滿，隨后神經(jīng)元開始裂解，突起逐漸減少，細胞已退化變性，輪廓模糊，光暈消失，細胞變形。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠皮層神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠皮層神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認(rèn)為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human late membrane protein 1 (LMP-1) ELISA Kit 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒

Humanerythrocytemembraneprotein,EMPELISAKit 人紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISA試劑盒人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物NADP依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Mouseacetylcholine,ACHELISAKit小鼠乙酰(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠壞死因子-a(mouse TNF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠壞死因子-b(mouse TNF-b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

大鼠20S蛋白酶體(20SP)ELISA試劑盒 ，英文名： 20SP ELISA Kit

Mouse parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒

Mousesignalansduction-Smad1ELISAKit 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT人甲肟前列腺素D2規(guī)格：48T/96

通用型豬胸膜肺炎(APP)試劑盒20次

ELISAKiteNOS-3大鼠內(nèi)皮型合成酶3規(guī)格：48T/96

TNFRSF17重組食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Metronidazole/OVA偶聯(lián)雞卵白蛋白 10mgMetronidazole/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白

SPINT1重組人 HAI-1 / SPINT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DCTPP1 Protein Human 重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ERBB4 Protein Mouse 重組小鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠皮層神經(jīng)元細胞Metronidazole/OVA 聯(lián)雞卵白蛋白

DCTPP1 Protein Human 重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF17重組食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ERBB4 Protein Mouse 重組小鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SPINT1重組人 HAI-1 / SPINT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。