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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠破骨細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠破骨分離自骨組織和骨髓；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞，屬于不增殖細胞群，不能增殖和傳代，只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠破骨經(jīng)TRAP染色檢測，純度可達30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導(dǎo)法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 多核巨細胞

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 人羥脯(Hyp)ELISA試劑盒

Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 人抗細胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAgrinELISA試劑盒人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進口分裝

大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 ，英文名： α-SMA ELISA Kit

Mouse oxytocin (OT) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB) 48T/96 進口分裝

CLIAKitforIgMELISAKit大鼠免疫球蛋白M規(guī)格：48T/96

通用型牛布氏桿菌(Brucellaabous)試劑盒20次

大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，48T/96大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，48T/96規(guī)格：48T/96

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標簽)

小鼠破骨細胞ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標簽)

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。